C-erbB-2siRNA對膽囊癌GBC-SD細(xì)胞增殖及凋亡的影響.pdf

1、目的:應(yīng)用RNA干擾技術(shù)，體外通過脂質(zhì)體介導(dǎo)將C-erbB-2基因的小干擾RNA(small interfering RNA，siRNA)轉(zhuǎn)染入膽囊癌GBC-SD細(xì)胞，特異性研究C-erbB-2 siRNA對膽囊癌GBC-SD細(xì)胞增殖及凋亡的影響。
　　方法:將化學(xué)合成的C-erbB-2 siRNA采用脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染入 GBC-SD細(xì)胞，采用 MTT法檢測轉(zhuǎn)染24h、48h、72h后細(xì)胞增殖抑制情況；采用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡情況

2、；采用RT-PCR檢測轉(zhuǎn)染前后C-erbB-2基因的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　1. MTT檢測結(jié)果顯示：C-erbB-2 siRNA轉(zhuǎn)染入膽囊癌GBC-SD細(xì)胞后，能有效抑制膽囊癌GBC-SD細(xì)胞的增殖，24h增殖抑制率為39.12％，分別與空白對照組和陰性對照組比較P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；48h增殖抑制率為46.51%，分別與與空白對照組和陰性對照組比較P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；72h增殖抑制率為47.

3、27%，分別與與空白對照組和陰性對照組比較P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。轉(zhuǎn)染72h后抑制細(xì)胞增殖作用最明顯，抑制率為47.27%，隨著轉(zhuǎn)染時(shí)間的延長，C-erbB-2 siRNA對細(xì)胞的增殖抑制作用顯上升趨勢。
　　2.流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示：轉(zhuǎn)染后實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞凋亡率為40.50%，空白對照組為3.95%，陰性對照組凋亡率9.61%，實(shí)驗(yàn)組凋亡率明顯高于空白對照組和陰性對照組（P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3.

4、RT-PCR檢測結(jié)果顯示：siRNA實(shí)驗(yàn)組 C-erbB-2基因的相對表達(dá)量為0.421±0.018，明顯低于空白對照組的1.001±0.057和陰性對照組的0.953±0.005；siRNA實(shí)驗(yàn)組分別與空白對照組和陰性對照組比較（P<0.01），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論:
　　1.C-erbB-2 siRNA能夠有效降低膽囊癌中C-erbB-2基因的表達(dá)水平；
　　2. C-erbB-2 siRNA能夠有效抑制膽