siRNA-Survivin對SiHa細胞增殖及凋亡影響的研究.pdf

1、子宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤之一，是位居全球第二的威脅婦女生命的惡性腫瘤，僅次于乳腺癌。據(jù)統(tǒng)計，我國每年新增病例為13.15萬，約占全球總數(shù)的1/3。而且宮頸癌的發(fā)病呈現(xiàn)年輕化趨勢。survivin基因表達產(chǎn)物是 Ambrosini等在1997年發(fā)現(xiàn)的一種新型凋亡抑制因子，屬于凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis proteins，IAP）家族成員之一。survivin是IAP家族中分子量最小的成員，是迄今發(fā)現(xiàn)的

2、最強凋亡抑制因子。研究表明survivin基因的表達具有高度特異性，成年人的正常組織不表達，而胚胎組織和多種腫瘤組織中表達廣泛，且腫瘤組織中survivin基因的表達與其惡性程度和患者的預(yù)后密切相關(guān)。survivin的分子生物學(xué)、組織分布特征、凋亡抑制機制及其與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、細胞周期的關(guān)系引起了研究者的廣泛關(guān)注，并已取得一定進展。
　　本研究主要針對人體正常宮頸組織、CINⅢ組織及宮頸癌組織，通過Western blottin

3、g和免疫組化的方法檢測Survivin蛋白在宮頸組織中的表達，驗證Survivin蛋白與宮頸癌發(fā)生的關(guān)系。并采用人宮頸癌SiHa細胞系，以RNA干涉的手段抑制survivin基因的轉(zhuǎn)錄和表達，觀察survivin基因沉默后對SiHa細胞增殖及凋亡的影響，并進一步通過檢測凋亡相關(guān)蛋白Caspase-9的表達與Caspase-3的表達激活情況，探討siRNA-survivin對SiHa細胞系的作用機制。
　　研究結(jié)果顯示，與正常宮頸組

4、織及CINⅢ相比，人宮頸癌組織中Survivin蛋白表達明顯增高。SiHa細胞轉(zhuǎn)染pU6-siRNA-survivin重組質(zhì)粒后，細胞中survivin基因的轉(zhuǎn)錄與表達下調(diào)，SiHa細胞的增殖受到抑制，細胞周期停滯于S期，細胞凋亡增加，Caspase-9的表達上調(diào)，Caspase-3的表達與激活增加，提示RNA干涉survivin后，可能通過增強凋亡通路中Caspase家族的活化，從而發(fā)揮促進細胞凋亡的作用。
　　本實驗研究證實S