CT灌注掃描及MRI動(dòng)態(tài)增強(qiáng)掃描定量評(píng)估索拉非尼抑制兔VX2肝種植瘤血管生成的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分：兩種方法制備兔VX2肝種植瘤模型的比較
　　目的：對(duì)比瘤組織塊穿刺包埋法與瘤細(xì)胞懸液法制備兔VX2肝種植瘤模型的差異。
　　方法：選取3.2±0.5kg健康的新西蘭大白兔36只，雌雄不限，隨機(jī)分為兩組，每組18只，分別采用開腹瘤組織塊穿刺包埋法與瘤細(xì)胞懸液法兩種方法制備兔VX2肝種植瘤模型，手術(shù)完成14天后，行MRI T1、T2平掃，觀察兩種方法制備肝種植瘤的形態(tài)，計(jì)算成瘤率。各組隨機(jī)處死2只荷瘤兔，首先觀察腫瘤大

2、體情況，后經(jīng)固定、包埋后常規(guī)切片，進(jìn)行HE染色，光鏡下觀察腫瘤組織形態(tài)及特點(diǎn)。
　　結(jié)果：
　　1.術(shù)后14天，腫瘤在核磁呈等T1長(zhǎng)T2信號(hào)影，部分腫瘤中心可見(jiàn)更高T2信號(hào)。瘤組織塊穿刺包埋法制備18只兔VX2肝種植瘤模型，意外死亡2只，2只大白兔未見(jiàn)腫瘤生長(zhǎng)，14只兔肝內(nèi)可見(jiàn)腫瘤生長(zhǎng)，造模成功率為77.7％；瘤細(xì)胞懸液法制備18只兔VX2肝種植瘤模型，意外死亡3只，2只大白兔未見(jiàn)腫瘤生長(zhǎng)，13只兔肝內(nèi)可見(jiàn)腫瘤生長(zhǎng)，造模成功

3、率為72.2%。本研究中，兩種造模方法差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　2.大體觀察腫瘤呈爛魚肉樣結(jié)節(jié)，灰白色，與周圍肝臟組織分界欠清楚，HE染色鏡下可見(jiàn)VX2腫瘤細(xì)胞異型性明顯，核大，深染，呈梭形，腫瘤細(xì)胞呈巢狀分布，排列紊亂，與周圍間質(zhì)分界欠清楚。
　　結(jié)論：開腹直視下瘤組織塊穿刺種植法和細(xì)胞懸液種植法種植 VX2腫瘤，兩種方法造模成功率之間差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，瘤組織塊穿刺種植法操作簡(jiǎn)便，便于觀察，因此，開腹直視

4、下瘤組織塊穿刺種植法更能滿足實(shí)驗(yàn)要求。
　　第二部分：CT灌注評(píng)估索拉非尼抑制兔 VX2肝種植瘤血管生成的實(shí)驗(yàn)研究
　　目的：定量分析CT灌注參數(shù)在索拉非尼治療兔VX2肝種植瘤前后各時(shí)間點(diǎn)的變化，并分析灌注參數(shù)與免疫組化指標(biāo)之間的相關(guān)性。
　　方法：術(shù)后7天，通過(guò)MRI篩選形狀規(guī)整、大小基本一致的兔VX2肝種植瘤30只，隨機(jī)分為兩組（各15只），實(shí)驗(yàn)組索拉非尼灌胃治療，對(duì)照組同等劑量5%葡萄糖灌胃治療。實(shí)驗(yàn)兔分別于治療

5、前、治療后7天、治療后14天進(jìn)行CT灌注掃描，掃描完成后傳入工作站進(jìn)行分析，記錄各時(shí)間點(diǎn)灌注參數(shù)的變化，最后一次灌注掃描結(jié)束后，將實(shí)驗(yàn)兔處死，行HE染色、MVD及VEGF免疫組化檢查。
　　結(jié)果：
　　1.實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組之間CT灌注參數(shù)BF、BV、ALP值有差別，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，PVP、HPI值差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P≥0.05)。實(shí)驗(yàn)組BF值治療前為54.92±11.93 ml/100ml/min，治療后7天

6、為26±6.44 ml/100ml/min，治療后14天為28.89±12.87 ml/100ml/min；對(duì)照組BF值治療前為56.43±10.54 ml/100ml/min，治療后7天為62.32±18.20ml/100ml/min，治療后14天為46.46±14.51 ml/100ml/min；實(shí)驗(yàn)組BV值治療前為9.23±0.52 ml/100ml，治療后7天為5.03±2.56 ml/100ml，治療后14天為4.39±2.3

7、2 ml/100ml；對(duì)照組BV值治療前為8.94±1.22 ml/100ml，治療后7天為9.94±1.66 ml/100ml，治療后14天為10.13±2.10 ml/100ml；實(shí)驗(yàn)組 ALP值治療前為51.83±5.21 ml/100ml/min，治療后7天為31.45±3.38 ml/100ml/min，治療后14天為27.98±3.13 ml/100ml/min；對(duì)照組ALP值治療前為51.17±2.57 ml/100ml/

8、min，治療后7天為48.48±9.52 ml/100ml/min，治療后14天為58.41±7.39 ml/100ml/min。
　　2.實(shí)驗(yàn)組治療7天后腫瘤直徑增大為0.23±0.06cm，治療14天后腫瘤直徑增大0.43±0.21cm；對(duì)照組治療后7天后腫瘤直徑增大0.31±0.09m，治療14天后腫瘤直徑增大1.48±0.56cm。治療7天后，兩組間腫瘤最大徑增大值?D差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；治療14天后，兩組

9、間腫瘤最大徑增大值?D差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　3.免疫組化分析兩組間MVD差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。相關(guān)性分析ALP與MVD、VEGF之間呈正相關(guān)（r值分別為0.614和0.57）。
　　結(jié)論：CT灌注可以評(píng)估索拉非尼治療兔VX2肝種植瘤前后的血流動(dòng)力學(xué)改變。肝動(dòng)脈灌注量ALP與MVD、VEGF呈正相關(guān)。
　　第三部分：DCE-MRI評(píng)估索拉非尼抑制兔 VX2肝種植瘤血管生成的實(shí)驗(yàn)研究
　

10、　目的：DCE-MRI定量檢測(cè)兔VX2肝種植瘤模型經(jīng)索拉非尼靶向治療前后的變化情況，將定量參數(shù)與免疫組化指標(biāo)MVD、VEGF進(jìn)行相關(guān)性分析，驗(yàn)證DCE-MRI進(jìn)行療效評(píng)估的可行性。
　　方法：CT灌注結(jié)束1小時(shí)后，將第二部分中的兩組實(shí)驗(yàn)兔進(jìn)行DCE-MRI掃描，并記錄定量參數(shù)Ktrans（單位：min-1）、Kep（單位：min-1）、Ve、Vp，最后一次掃描結(jié)束后，處死實(shí)驗(yàn)兔，行HE染色、MVD及VEGF免疫組化檢查。
　

11、　結(jié)果：
　　1.實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組之間DCE-MRI參數(shù)Ktrans、Kep有差別，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),Ve、Vp差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P≥0.05)。
　　實(shí)驗(yàn)組值 Ktrans治療前為0.34±0.12 min-1，治療后7天為0.23±0.04 min-1，治療后14天為0.13±0.03 min-1；對(duì)照組Ktrans值治療前為0.35±0.06 min-1，治療后7天為0.36±0.07 min-1，治療后

12、14天為0.42±0.09min-1；實(shí)驗(yàn)組值Kep治療前為2.32±1.14 min-1，治療后7天為1.70±0.96min-1，治療后14天為1.05±0.71min-1；對(duì)照組Kep值治療前為3.02±2.11min-1，治療后7天為2.70±0.70min-1，治療后14天為1.47±0.69min-1；
　　2.實(shí)驗(yàn)組治療7天后腫瘤直徑增大為0.23±0.06cm，治療14天后腫瘤直徑增大0.43±0.21cm；對(duì)照組

13、治療后7天后腫瘤直徑增大0.31±0.09m，治療14天后腫瘤直徑增大1.48±0.56cm。兩組間腫瘤最大徑增大值?D差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；治療14天后，兩組間腫瘤最大徑增大值?D差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　3.免疫組化分析兩組間MVD差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。相關(guān)性分析Ktrans與MVD、VEGF之間呈正相關(guān)（r值分別為0.792和0.651）。
　　結(jié)論：MRI灌注可以定量評(píng)估索拉非