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文檔簡介
1、用免疫組化、RT-PCR兩種方法,分別從蛋白、基因?qū)用鏈y定放射性肺損傷大鼠在不同時(shí)間點(diǎn),四種因子的表達(dá)變化,研究益氣活血方對(duì)放射性肺損傷的防治作用,揭示其可能的作用機(jī)制。
健康雌性成年SD大鼠共108只,隨機(jī)分為模型組(model group)36只、空白對(duì)照組(control group)36只、照射加中藥組(Chineseherbology group)36只。模擬機(jī)下定位確定照射區(qū)域,照射野一般為3×3cm大小,5Gy/
2、次,共6次,每周2次。模型組、中藥組大鼠用6MV-X直線加速器照射其右肺,對(duì)照組只進(jìn)行麻醉,不行照射。中藥組大鼠于受照射當(dāng)天開始,用益氣活血方1ml灌胃,2次/日,模型組及對(duì)照組用蒸餾水1ml灌胃,2次/日,停止時(shí)間為照射結(jié)束后2周。三組大鼠分別于照射后第2,4,8,12,16,20周末隨機(jī)抽取6只,取其右肺組織保存。用RT-PCR方法檢測TGF-β1、TNF-a、NOS3、MTHFR mRNA在各時(shí)間點(diǎn)表達(dá),用免疫組化法檢測TGF-β
3、1、TNF-a、NOS3、MTHFR在各時(shí)間點(diǎn)的蛋白表達(dá),實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS.19.0做統(tǒng)計(jì)分析。
中藥與模型組TGF-β1、TNF-a、NOS3、MTHFR mRNA及免疫組化表達(dá)積分光密度(IOD)值于照射后第2周至20周表現(xiàn)出先增高后下降的趨勢,第2周開始升高,第8周達(dá)高峰,12周開始下降,16周后逐漸降低,與對(duì)照組相比,變化具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。中藥組與模型組相比TGF-β1、TNF-a表達(dá)降低,NOS3、MTHFR表達(dá)增高
4、,均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
研究顯示TGF-β1、TNF-a、NOS3、MTHFR可能為放射性肺損傷發(fā)生的敏感因子。益氣活血方在放射性肺損傷各階段,從轉(zhuǎn)錄及翻譯層面對(duì)TGF-β1、TNF-a、NOS3、MTHFR的表達(dá)進(jìn)行調(diào)控,使TGF-β1、TNF-a、NOS3、MTHFR表達(dá)趨于平衡,從而減輕放射性肺損傷,這可能是該藥防治放射性肺損傷的分子生物學(xué)機(jī)制。放射治療結(jié)束后各相關(guān)細(xì)胞因子仍持續(xù)高表達(dá)到16周,提示放射性肺損傷治療時(shí)間應(yīng)延
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