PI3K-mTOR抑制劑NVP-BEZ235抑制甲狀腺癌細胞增殖并促進細胞凋亡的作用研究.pdf

1、目的:
　　研究PI3K/mTOR信號通路抑制劑NVP-BEZ235體外抑制甲狀腺癌細胞的增殖，并誘導(dǎo)其凋亡的作用及分子機制，為甲狀腺癌的臨床治療提供新的分子靶點。
　　方法:
　　體外培養(yǎng)甲狀腺癌 SW579細胞，采用 MTT檢測抑制劑 NVP-BEZ235對甲狀腺癌SW579細胞的抑制作用，繪制SW579生存曲線，篩選藥物濃度。SW579細胞中加入100nM、250μM的BEZ235藥物，對照組加入等體積的DMSO

2、，作用48h后，提取蛋白，應(yīng)用Western blot法檢測甲狀腺癌SW579細胞中細胞周期蛋白Cyclin A、Cyclin B1和Cyclin D1的變化情況，檢測 BEZ235對 SW579細胞周期的抑制作用。再次應(yīng)用 Western blot法檢測PI3K/mTOR信號通路蛋白和凋亡蛋白的變化情況。
　　結(jié)果:
　　1. NVP-BEZ235可抑制SW579細胞的增殖。MTT實驗結(jié)果表明，用BEZ235阻斷PI3K/

3、mTOR信號通路可抑制甲狀腺癌細胞SW579的增殖；Western blot結(jié)果表明，甲狀腺癌SW579細胞中Cyclin A、Cyclin B1和Cyclin D1蛋白的表達水平均隨BEZ235的濃度（100nM、250μM）增高而降低。2. NVP-BEZ235可抑制PI3K/mTOR信號通路蛋白的表達。甲狀腺癌SW579細胞中p-Akt、p-S6和p-4E-BP1蛋白的表達水平均隨BEZ235的濃度（100nM、250μM）增高而

4、降低。3. NVP-BEZ235可通過激活caspase-3/8和 PARP來誘導(dǎo)SW579細胞凋亡。Western blotting結(jié)果顯示，經(jīng)NVP-BEZ235處理后，Caspase-3、Caspase-8和PARP出現(xiàn)裂解條帶，且隨NVP-BEZ235濃度的升高而表達增強。
　　結(jié)論:
　　1. NVP-BEZ235可通過下調(diào)細胞周期蛋白的表達效抑制體外甲狀腺癌 SW579細胞的增殖。
　　2. NVP-BEZ