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1、目的:哮喘是一種嚴(yán)重威脅人類健康的慢性炎癥性呼吸道疾病,其發(fā)病率和病死率有逐年增加的趨勢(shì)。隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展,已經(jīng)明確了易感基因ADAM33、ORMDL3與哮喘的發(fā)生密切相關(guān)。黃芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS)為中藥黃芪主要成分之一,具有抗炎、調(diào)節(jié)免疫、抗衰老、降壓、保肝等作用[1]。本研究通過體外培養(yǎng)人支氣管上皮細(xì)胞(16HBE),觀察中藥復(fù)方固本防哮飲中君藥黃芪的有效單體黃芪多糖對(duì)人支氣管上皮細(xì)
2、胞ADAM33、ORMDL3基因表達(dá)的影響,初步探討其可能的機(jī)制,為中醫(yī)藥防治哮喘的研究提供新的突破點(diǎn)。
方法:體外培養(yǎng)16HBE,設(shè)APS20ug/ml、100ug/ml、500ug/ml3種濃度組及空白對(duì)照組、模型組和地塞米松組。白細(xì)胞介素(Interleukin,IL)-4刺激16HBE模擬體內(nèi)炎癥浸潤(rùn),誘導(dǎo)細(xì)胞ADAM33、ORMDL3高表達(dá),RT-PCR及Western Blot方法檢測(cè)各組細(xì)胞中ADAM33、ORM
3、DL3 mRNA和蛋白水平的表達(dá),每組實(shí)驗(yàn)獨(dú)立重復(fù)3次。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((x)±s)表示,兩間比較采用單因素方差分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P>0.05表示差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:1.IL-4能夠誘導(dǎo)人支氣管上皮細(xì)胞ADAM33、ORMDL3高表達(dá)且呈一定的時(shí)間-效應(yīng)關(guān)系。
IL-4能夠明顯增強(qiáng)ADAM33、ORMDL3的表達(dá),與對(duì)照組相比P<0.05
4、,刺激24h后表達(dá)更顯著,與對(duì)照組、12h、18h、36h組相比P<0.01,并且隨著時(shí)間增加(0-24h)表達(dá)也增加。
2.APS能夠下調(diào)ADAM33、ORMDL3表達(dá)。
與模型組相比,黃芪多糖組ADAM33 mRNA及蛋白表達(dá)降低(P<0.05),20ug/ml、100ug/ml、500ug/ml3種濃度組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),提示黃芪多糖對(duì)ADAM33的影響與濃度無關(guān)。與模型組相比,黃芪多糖組O
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