煤焦瀝青煙提取物對永生化人支氣管上皮細胞COX-2基因表達的誘導作用.pdf

1、背景：
　　 肺癌是我國乃至世界上最為常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率和病死率逐年升高，已經(jīng)成為城市惡性腫瘤中威脅最大的腫瘤類型。肺癌的治療效果得不到提高的原因主要是難以早期診斷，若可早期診斷和治療，則患者生存率可明顯上升。肺癌可能是由多種因素共同作用的結果，其中接觸工業(yè)致癌毒物在肺癌病因中占有一定的比重。煤焦瀝青（CoalTarPitch，CTP）是煤使用和工業(yè)煉焦過程中的副產(chǎn)品，為人類確切致癌物(G1)。環(huán)氧化酶-2(Cyclo

2、oxygenase-2，COX-2)在多種惡性腫瘤中存在高表達，與多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關，多種研究顯示COX-2是炎癥促癌的一種關鍵因子。
　　 目的：
　　 闡明CTPE對人支氣管上皮細胞COX-2基因表達的影響;揭示CTPE誘導COX-2基因表達的分子生物學機制。
　　 方法：
　　 以人支氣管上皮細胞株（BEAS-2B）為體外模型。用RT-PCR法測定CTPE對COX-2mRNA表達水平的影

3、響。使用轉錄抑制劑放線菌素D對BEAS-2B細胞株作用，觀察CTPE對COX-2基因轉錄的影響。利用COX-2mRNA降解試驗測定CTPE對轉錄后COX-2mRNA穩(wěn)定性的影響。利用三種特異性信號通路抑制劑預處理細胞株，來推測其對CTPE誘導BEAS-2B細胞COX-2mRNA表達的調控機制。
　　 結果：
　　 CTPE刺激可致BEAS-2B細胞內COX-2mRNA水平明顯升高，該作用呈時間(2～8h)及劑量(2～8μ

4、g/ml)依賴性(P=0.001)。用轉錄抑制劑放線菌素D(1μg/ml)預處理細胞30min，可明顯降低CTPE(2μg/ml，4h)對COX-2mRNA表達的誘導作用(P=0.001)，表明CTPE在轉錄水平調控COX-2基因表達。使用硫酸鋅刺激提高COX-2mRNA表達后，再使用放線菌素D終止COX-2mRNA合成的前提下，CTPE（2μg/ml）刺激可明顯減緩細胞內COX-2mRNA的降解，表現(xiàn)為在不同時間點(0，2，4h)，C

5、TPE處理組COX-2mRNA水平均較相應對照組（DMSO組）高（P值分別為0.001、0.002、0.001），說明CTPE對COX-2mRNA有穩(wěn)定作用。利用三種特異性細胞信號傳導通路抑制劑預處理BEAS-2B細胞，均可明顯降低CTPE(2μg/ml，4h)對COX-2mRNA的誘導作用(P=0.001)，說明CTPE通過EGFR、PI3K和p38通路調節(jié)BEAS-2B細胞COX-2mRNA的表達過程。
　　 結論：