溶藻弧菌肽聚糖對凡納濱對蝦常用免疫指標(biāo)、脂肪酸含量及基因表達(dá)差異的影響.pdf

1、本文從溶藻弧菌中提取其細(xì)胞壁成分肽聚糖,利用超聲波方法使其完全溶解后,注射到凡納濱對蝦肌肉中進(jìn)行免疫刺激,測定血清中 SOD、NOS酶活及肝胰臟中脂肪酸組分及含量,并對其肝胰臟做高通量測序轉(zhuǎn)錄組分析,探究肽聚糖作免疫刺激后基因表達(dá)量的差異,同時分析酶活變化、脂肪酸含量變化及基因表達(dá)差異之間的相關(guān)性,研究結(jié)果如下:
　　1.從溶藻弧菌中提取肽聚糖的得率為5.98％,300 W,30 min超聲波助溶后無固體殘留,肽聚糖完全溶解。

2、r>　　2.用濃度為0.05 mg/mL、0.1 mg/mL和0.15 mg/mL的溶藻弧菌肽聚糖對凡納濱對蝦進(jìn)行注射免疫刺激,結(jié)果表明:溶藻弧菌肽聚糖對血清中一氧化氮合成酶活力(NOS)、超氧化物歧化酶活力(SOD)有極顯著性影響(P<0.01),其中0.05 mg/mL組、0.1 mg/mL組和0.15 mg/mL組NOS活力在12 h、72 h和24 h達(dá)到最大值,SOD活力在48 h、72 h和24 h達(dá)到最大值;各處理組在出現(xiàn)

3、最大值之后,隨著時間延長而逐漸趨于對照組的水平。
　　3.用0.1 mg/mL的溶藻弧菌肽聚糖對凡納濱對蝦進(jìn)行注射免疫刺激,對其肝胰臟脂肪酸組分及含量進(jìn)行測定,結(jié)果表明:飽和脂肪酸共有8種,以C16:0和C18:0為主,單烯脂肪酸共有5種,以C18:1為主,多不飽和脂肪酸共有8種,其中以C18:2和C20:5為主;飽和脂肪酸含量相對下降了2.27%,多不飽和脂肪酸含量最大上升4.43%,n-3系列不飽和脂肪酸含量顯著提高,72 h

4、組為最大值。n-6系列不飽和脂肪酸含量相對恒定,變化不顯著,C14:0和C15:0到實(shí)驗(yàn)結(jié)束時仍然處于下降階段,C16:0、C16:1和C20:0含量總體表現(xiàn)為下降,C22:0、C22:4、C24:1在實(shí)驗(yàn)期間含量下降后又逐漸回升,C20:0在168 h時仍處于上升階段,C22:4在72 h時處于最低值,而C24:1在注射后8 h時出現(xiàn)最低值。
　　4.對用0.1 mg/mL的溶藻弧菌肽聚糖注射免疫刺激和0.9%生理鹽水注射為對照

5、的凡納濱對蝦肝胰臟進(jìn)行高通量測序轉(zhuǎn)錄組分析,成功構(gòu)建了凡納濱對蝦肝胰臟的轉(zhuǎn)錄組文庫。unigene組裝結(jié)果總計(jì)達(dá)28,433個,總長度為30,192,474 nt,unigene平均長度為1,062 nt,N50為1,945 nt。unigene功能注釋到各個NR、NT、Swiss-Prot、KEGG、COG、GO數(shù)據(jù)庫的unigene的分別為14,857個,8,340個,13,492個,11,783個,6,991個,7,602個。所有