p65-miR-23a-27a-24調(diào)控急性髓性白血病分化的研究.pdf

1、研究目的：本課題旨在探索p65/miR-23a-27a-24對(duì)急性髓性白血病的調(diào)控及其在急性髓性白血病發(fā)生發(fā)展中的作用，為急性髓性白血病的治療提供新的理論基礎(chǔ)和潛在的治療靶點(diǎn)。
　　研究方法：
　　分別用Western blot和Realti me PCR技術(shù)檢測(cè)急性髓性白血病細(xì)胞、白血病病人外周血單核細(xì)胞p65及mi R-23a-27a-24的表達(dá)水平。以抗白血病藥物誘導(dǎo)急性髓性白血病細(xì)胞分化后，檢測(cè)p65及mi R-23

2、a-27a-24的水平變化。抑制p65或miR-23a-27a-24水平后觀察急性髓性白血病細(xì)胞的分化水平。構(gòu)建白血病小鼠動(dòng)物模型，研究p65及miR-23a-27a-24對(duì)白血病小鼠生存期或者腫瘤擴(kuò)散的影響。應(yīng)用生物信息學(xué)軟件結(jié)合分子手段探索p65對(duì)miR-23a-27a-24的調(diào)節(jié)作用，并在細(xì)胞和動(dòng)物水平驗(yàn)證p65/miR-23a-27a-24調(diào)控軸作用。
　　研究結(jié)果：
　　本課題發(fā)現(xiàn)p65在急性髓性白血病細(xì)胞分化后表

3、達(dá)水平降低，抑制p65水平可以促進(jìn)白血病細(xì)胞分化成熟，并且檢測(cè)到臨床急性髓性白血病細(xì)胞(AML)和急性早幼粒細(xì)胞(APL)患者外周血單核細(xì)胞 p65水平較高。通過(guò)軟件預(yù)測(cè)并結(jié)合CHIP實(shí)驗(yàn)證實(shí)p65直接結(jié)合miR-23a-27a-24的啟動(dòng)子。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)miR-23a-27a-24在急性髓性白血病細(xì)胞分化后表達(dá)水平降低，抑制miR-23a-27a-24可以促進(jìn)急性髓性白血病細(xì)胞分化成熟，同時(shí)檢測(cè)到臨床AML和APL患者外周血單核細(xì)胞

4、miR-23a-27a-24水平較高，過(guò)表達(dá)miR-23a-27a-24會(huì)促進(jìn)白血病小鼠發(fā)生腫瘤擴(kuò)散。深入研究發(fā)現(xiàn)miR-23a-27a-24 mi mics能夠在細(xì)胞水平影響p65對(duì)成熟紅系蛋白的調(diào)節(jié)作用，并且p65抑制劑可以延長(zhǎng)白血病小鼠的生存期，促進(jìn)白血病細(xì)胞分化以及減少腫瘤肝臟擴(kuò)散，而miR-23a-27a-24 mi mics能夠影響p65抑制劑的治療效果。
　　研究結(jié)論：
　　持續(xù)升高的p65/miR-23a-2