兒童急性髓細胞性白血病的預后相關因素研究.pdf

1、目的：通過檢測兒童急性髓細胞性白血病(AML)患者的NPM1基因突變，大劑量阿糖胞苷化療后Ara-c及其代謝物阿糖尿苷的血濃度以及白血病細胞的免疫標記，研究疾病本身因素和宿主因素兩方面對兒童AML的預后影響。 方法：①構(gòu)建NPM1 cDNA 片段的野生型和突變型質(zhì)粒,分別建立野生型和突變型的PCR擴增標準曲線，然后通過HRM-PCR和HRM分析檢出70例AML樣本中NPM1基因突變情況。分析NPM1基因突變和兒童急性髓細胞性白血

2、病患者臨床表現(xiàn)和預后間的關系。②采用高效液相色譜法測定32例AML患兒Ara-c，Ara-u的血濃度，并進行預后分析。③采用流式細胞術測定101例AML患兒的免疫表型，結(jié)合臨床資料進行預后分析。 結(jié)果：⑴經(jīng)測序分析證實HRM法能高靈敏度、高特異性地檢測NPM1基因突變。本組研究病例中，NPM1基因突變陽性率45.7％。NPM1突變組和NPM1 野生組在臨床各項指標上（如性別、年齡、外周血白細胞數(shù)、乳酸脫氫酶、血清鐵蛋白、骨髓腫瘤

3、細胞比例等）的差異不大，但外周血小板數(shù)有差異；NPM1突變組的第一療程緩解率（81.3％）、5年無事件生存率EFS（64.4％），5年總生存率OS（63.1％）相對較高，但未發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計學有顯著性差異，故有待進一步擴大樣本后繼續(xù)研究。⑵大劑量Ara-c化療時血藥高峰濃度平均為39.46±15.13umol/L，Ara-u血濃度平均為258.23±58.23 umol/L。32例患兒中共有12例復發(fā)，20例長期生存組中120min時Ara-c

4、血濃度平均為42.65±17.27 umol/L，復發(fā)組為34.15±8.96 umol/L，兩組比較P值0.126。相應Ara-u 濃度長期生存組261.12±59.60 umol/L，復發(fā)組253.42±58.13umol/L，兩組比較P值0.723。⑶CD34陰性組以及CD34和HLA-DR 同時陰性組一療程CR 率均明顯高于非陰性組，差異有統(tǒng)計學意義（P=0.008，0.000）；從EFS來看，CD34陰性組，HLA-DR陰性組

5、以及CD34和HLA-DR同時陰性組均明顯高于非陰性組，差異有統(tǒng)計學意義（P=0.004，0.006，0.04），而CD14，CD15，CD7，CD19 差異對CR和EFS均無統(tǒng)計學意義。 結(jié)論：①HRM法能高靈敏度、高特異性地檢測NPM1基因突變。NPM1突變組和NPM1野生組在臨床各項指標上的差異不大，NPM1突變組的第一療程緩解率、5年EFS、5年OS相對較高，但未發(fā)現(xiàn)顯著性差異。②Ara-c、Ara-u血濃度個體差異較大