Nanog調(diào)控急性髓性白血病干細(xì)胞增殖及致瘤的作用機(jī)制研究.pdf

1、 暨南大學(xué) 暨南大學(xué)博士 博士學(xué)位論文 學(xué)位論文 題名（中英對照）:Nanog 調(diào)控急性髓性白血病干細(xì)胞增殖及致瘤的作用機(jī)制研究 Nanog regualtes the proliferation and tumorigenicity of acute myeloid leukemia stem cells 作者姓名： 徐單單 指導(dǎo)教師姓名 及學(xué)位、職稱：王一飛 博士 教授 學(xué)科、專業(yè)名稱：生物醫(yī)藥 論文提交日期：2016.0

2、6.08 論文答辯日期：2016.5.26 答辯委員會主席：曾耀英 論文評閱人：盲審 暨南大學(xué)博士學(xué)位論文 I Nanog 調(diào)控白血病干細(xì)胞增殖及 調(diào)控白血病干細(xì)胞增殖及致瘤 致瘤的作用 作用機(jī)制研究 機(jī)制研究 摘要： 摘要： 背景 背景：白血病是惡性血液性疾病，白血病干細(xì)胞被認(rèn)為是白血病反復(fù)耐藥以及復(fù)發(fā)的根源所在，靶向白血病干細(xì)胞被認(rèn)為是能夠治療白血病的一種途徑。本研究在前期工作基礎(chǔ)上， 采用磁珠分選方法分離白血病干細(xì)胞， 并從 mi

3、R-150、 Nanog、IGF1R、STAT3 等方面深入探討并研究了白血病干細(xì)胞增殖、以及成瘤的機(jī)制。 方法 方法： （1）在前期研究工作基礎(chǔ)上，采用磁珠分選方法從 KG-1a 與 MOLM13 兩株白血病細(xì)胞系分選白血病干細(xì)胞，通過 Western blotting 與 qPCR 確定重要因子Nanog、Oct4、Sox2 以及 IGF1R、STAT3 的表達(dá)水平，并檢測 Nanog 在臨床樣本中的表達(dá)； （2） 雙熒光素酶報告基

4、因載體、 染色質(zhì)免疫共沉淀、 突變載體、 Western blotting 以及 qPCR 分析研究轉(zhuǎn)錄 Nanog 調(diào)控白血病干細(xì)胞增殖以及致瘤的機(jī)制研究； （3）免疫共沉淀確定 Nanog 與 STAT3 的相互作用、流式細(xì)胞儀分析 Nanog調(diào)控細(xì)胞凋亡的作用； （4）熒光素酶實驗分析 miR-150 調(diào)控 Nanog 的機(jī)制研究。結(jié)果 結(jié)果： （1）細(xì)胞水平與臨床樣本水平均顯示 Nanog 高表達(dá)，為下一步的研究奠定基礎(chǔ)； （2

5、）Nanog 是調(diào)控白血病干細(xì)胞增殖、以及致瘤的重要因素； （3）在白血病干細(xì)胞 STAT3 是 Nanog 啟動子的一個轉(zhuǎn)錄因子，STAT3 反式激活 Nanog 的表達(dá)； （4） Nanog 與 STAT3 的相互作用是白血病干細(xì)胞增殖以及抗凋亡的部分原因；（5）Nanog/IGF1R/STAT3 信號軸具有調(diào)控白血病干細(xì)胞增殖及致瘤的功能； （6）在白血病干細(xì)胞中我們發(fā)現(xiàn) Nanog 是 miR-150 的一個靶標(biāo)，miR-150

6、 通過直接作用 Nanog 的 3′-UTR 調(diào)控其表達(dá)，進(jìn)而影響 Nanog 的功能。 結(jié)論 結(jié)論：Nanog/IGF1R/STAT3 信號軸是調(diào)控白血病干細(xì)胞增殖以及成瘤的關(guān)鍵信號通路， 這為以后更深入的實驗研究與白血病臨床治療指明了方向。 另外， Nanog 是miR-150 的功能性靶標(biāo)，這提示我們白血病干細(xì)胞的信號調(diào)控是多因素的復(fù)雜過程。 關(guān)鍵詞 關(guān)鍵詞：白血病干細(xì)胞；Nanog；IGF1R；STAT3；miR-150；增殖；