G蛋白β2亞基調節(jié)線粒體融合.pdf

1、線粒體是一個處于動態(tài)融合與分裂的變化的細胞器，其融合與分裂對其生理功能起著非常重要的作用。其中Mfn1蛋白是介導調控線粒體融合的重要分子之一。目前關于Mfn1在介導線粒體融合時，如何被調控尚不完全清楚，本研究對Gβ2蛋白通過Mfn1調控線粒體融合的分子機制作初步探討。
　　 我們通過酵母雙雜交技術，成功利用Mfn1蛋白的241-387氨基酸序列，從胎肝文庫中發(fā)現(xiàn)一靶蛋白--Gβ2蛋白。Gβ2蛋白是異源三聚體G蛋白β亞基家族的同源

2、異構體之一，它可以與Gγ亞基組成二聚體或直接以單體的形式在信號轉導中發(fā)揮作用。我們實驗室通過免疫共沉淀實驗的檢測，結果發(fā)現(xiàn)Gβ2蛋白和Mfh1蛋白在細胞內(nèi)可以發(fā)生直接的相互作用，這表明Gβ2蛋白和調節(jié)線粒體融合相關。目前除了傳導信號外，關于Gβ2蛋白如何調控線粒體融合機制尚不清楚。
　　 我們首先采用免疫熒光和細胞組分分離的方法證明，Gβ2蛋白部分定位于線粒體上。Gβ2蛋白能夠影響線粒體的形態(tài)，在外源表達Gβ2蛋白時，細胞的線粒

3、體發(fā)生聚集；而Gβ2敲減的細胞中，線粒體形態(tài)破碎成短管狀和小球狀，此系統(tǒng)再恢復Gβ2蛋白的表達則可以恢復線粒體的網(wǎng)絡形態(tài)。此外，在Mfn1敲除的MEF細胞中恢復表達Gβ2蛋白并不能恢復線粒體的形態(tài)。
　　 Gβ2蛋白高表達的細胞中線粒體聚集在核周，提示線粒體可能沿著微管進行了負向的運動。因此我們也觀察了Gβ2蛋白對微管的影響。在Gβ2蛋白敲減的細胞中，觀察到微管的異常的排列。免疫共沉淀實驗的結果也證明Gβ2蛋白和微管會發(fā)生相互作