乳酸菌組合發(fā)酵產(chǎn)奶味香精及a-乙酰乳酸合成酶基因的克隆和表達.pdf

1、隨著人們生活水平的提高，乳及各種乳制品已經(jīng)逐漸成為人們?nèi)粘Ｉ攀车闹匾M成部分。而乳制品因其具有較高的營養(yǎng)價值，以及令人喜愛的口感和香氣，使得奶味香精是香精香料領(lǐng)域中投資最大、開發(fā)研究最為活躍的香精之一。由生物法制備的天然奶味香精突破了傳統(tǒng)思維方式，其香氣更加自然、逼真、柔和，對加香產(chǎn)品內(nèi)在質(zhì)量有明顯的改善和提高，是單體香料調(diào)配而成的同類奶味香精所達不到的。因此，微生物發(fā)酵制備天然奶味香精，符合當(dāng)前的消費趨勢，具有廣闊的市場前景。

2、　　本文研究了用于奶味香精萃取、濃縮等前處理的固相微萃取工藝，通過主要成分2,3-丁二酮及3-羥基丁酮的測定及GC-MS關(guān)于揮發(fā)性香味成分的分析篩選出最佳固相微萃取頭為75μmCAR/PDMS；同時對固相微萃取的條件進行優(yōu)化，得出最適萃取溫度為75℃、最適平衡時間為15min，最適萃取時間為30min。
　　對七株乳酸菌進行組合發(fā)酵，得到兩組產(chǎn)不同香型組合，分別為組合菌Lb+208+334和組合菌St2+334。正交試驗結(jié)果得出組

3、合菌Lb+208+334產(chǎn)2,3-丁二酮的最優(yōu)發(fā)酵條件：碳源為葡萄糖、檸檬酸銨濃度為0.5％、CuSO40.5ml，飽和NaCl10ml；產(chǎn)3-羥基丁酮的最優(yōu)發(fā)酵條件：碳源為蔗糖、檸檬酸銨濃度為0.8%、飽和NaCl10ml；產(chǎn)丁位癸內(nèi)酯的最優(yōu)發(fā)酵條件：碳源為葡萄糖、檸檬酸銨濃度為0.5%、CuSO41ml，飽和NaCl5ml。
　　組合菌St2+334產(chǎn)2,3-丁二酮的最優(yōu)發(fā)酵條件：碳源為乳糖、檸檬酸銨濃度為0.2%、CuSO4

4、1ml，飽和NaCl5ml；產(chǎn)3-羥基丁酮的最優(yōu)發(fā)酵條件：碳源為乳糖、檸檬酸銨濃度為0.8%、飽和NaCl1ml；產(chǎn)丁位癸內(nèi)酯的最優(yōu)發(fā)酵條件：碳源為乳糖、檸檬酸銨濃度為0.2%、CuSO41ml，飽和NaCl10ml。
　　本文對所篩菌CR5-3進行16srRNA鑒定知該菌為嗜熱鏈球菌，以其為原始菌，克隆并表達了乳酸菌發(fā)酵代謝途徑中第一步反應(yīng)的關(guān)鍵酶基因-α-乙酰乳酸合成酶基因（aldS）。通過對重組菌株的產(chǎn)香發(fā)酵研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)與