BMSCs移植對(duì)PD大鼠腦紋狀體內(nèi)DA水平及AADC表達(dá)影響的研究.pdf

1、BMSCs移植對(duì)PD大鼠腦紋狀體內(nèi)DA水平及AADC表達(dá)影響的研究ResearchontheDAandAADCExpressionbyBMSCsTransplantationinPDRats本研究由國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31172284)江蘇省高校優(yōu)勢(shì)學(xué)科建設(shè)工程資助項(xiàng)目(PAPD)資助研究生：臧矯導(dǎo)師：邢華副教授趙寶華研究員揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院二零一六／年五月一夸一＼，牛直月II揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文了HPLC檢測(cè)色譜條件，即WatersS

2、ymmrtryshieldTMRPl8柱，流動(dòng)相為005mol／L磷酸二氫鈉002mol／L檸檬酸甲醇(74：24：2)，流速為10mL／min，外標(biāo)法定量，紫外吸收波長(zhǎng)k為280nlll；通過(guò)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品的測(cè)定，以多巴胺濃度(X)為橫坐標(biāo)，以多巴胺標(biāo)準(zhǔn)品色譜峰峰面積(Y)為縱坐標(biāo)，進(jìn)行回歸計(jì)算，獲取標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=16343x30812，其相關(guān)系數(shù)R2=O9996，具有較好的相關(guān)性；平均回收率分別為904％，911％，932％；RSD分別為

3、34％，81％，5％；檢測(cè)限為05mg／L，定量限為108megL，符合生物樣品前處理的要求。以建立的HPLC方法對(duì)樣品的檢測(cè)結(jié)果顯示，N組大鼠腦紋狀體內(nèi)DA的含量為1556士216lLLg／g；M4組、M8組大鼠損毀側(cè)腦紋狀體內(nèi)DA含量分別為1067士154ptg／g和1050士232“∥g，M4組與M8之間不存在差異(P005)，而M4組、M8組均極顯著低于N組(P001)；T4組與T8組大鼠損毀側(cè)腦紋狀體內(nèi)DA含量分別為1270士

4、291蚓g和1371士242∥g，其中T4組顯著高于M4組、M8組(P005)，T8組極顯著高于M4組、M8組(PO01)，表現(xiàn)出隨細(xì)胞移植時(shí)間的延長(zhǎng)DA水平逐漸恢復(fù)的趨勢(shì)。研究顯示，BMSCs移植治療技術(shù)對(duì)PD模型大鼠的行為改善起明顯作用，且能提高腦紋狀體內(nèi)DA的含量。提示移植的外源BMSCs，可能通過(guò)分化為多巴胺能神經(jīng)元或促進(jìn)其功能恢復(fù)、增加DA的分泌，進(jìn)而改善PD模型的癥狀。實(shí)驗(yàn)二BMSCs移植對(duì)PD模型大鼠腦紋狀體AADC表達(dá)影

5、響的研究本研究通過(guò)檢測(cè)多巴胺合成途徑的限速酶一芳香族氨基酸脫羧酶(AADC)的表達(dá)，探究BMSCs移植治療PD中引起DA含量變化的作用途徑。實(shí)驗(yàn)分別提取正常大鼠(N組)、PD模型大鼠(M組)和BMSCs移植治療大鼠(T組)腦紋狀體的總RNA、miRNA和總蛋白，以熒光定量PCR、WesternBlot和免疫組化等方法檢測(cè)腦紋狀體內(nèi)AADC的mRNA、miRNA和蛋白，分析PD模型大鼠治療前后AADC的mRNA、miRNA表達(dá)水平變化與蛋