電針協同BMSCs移植治療對腦出血大鼠學習記憶能力的影響及機理研究.pdf

1、 目的：通過觀察 Morris 水迷宮測試成績,血清中乙酰膽堿酯酶(AchE)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量和海馬突觸素(SYP)、神經生長相關蛋白-43(GAP-43)、突觸后致密物-95(PSD-95)蛋白表達,探討Ea協同BMSCs移植治療對腦出血大鼠學習記憶能力的療效及其可能的機制。方法：(1)將BMSCs復蘇、擴增和誘導,收集細胞備用。(2)選用成年SD大鼠進行Morris水迷宮訓練4天,每天進行4次訓練,

2、第5天進行學習記憶能力測試,篩選逃避潛伏期少于30秒的大鼠隨機分為BMSCs組、Ea組、電Ea-BMSCs組、NS組、FO組和Normal組。(3)前4組采用膠原酶及肝素混合液勻速推進尾殼核制備大鼠ICH模型,在術后第3天時分別通過移植BMSCs、電針刺激、移植BMSCs協同電針刺激和注射0.9%NS進行治療,每組再分為1天、3天、5天、7天、14天五個亞組并給予對應喂養(yǎng)天數；選取“大椎”與“百會”二穴進行電針治療,每天只行一次治療。假

3、手術組僅進針但不注入膠原酶和肝素,也不進行治療；正常組不施加任何處理措施。(4)在相應時間點對各組實驗大鼠進行Morris水迷宮測試,然后取材。(5)檢測血清中AchE、SOD和MDA的含量,免疫組織化學檢測SYP、GAP-43和 PSD-95的表達。結果：(1)造模型之前對各組實驗大鼠進行水迷宮測試,各組間沒有檢測出統(tǒng)計學差異(P>0.05)。在腦出血治療后水迷宮檢測,反映學習記憶能力的指標隨時間延長而好轉,在1d時Ea組成績比其他組

4、好(P<0.05)；在3、5、7、14d時,NS組成績比其他治療組差(3d時BMSCs組除外)(P<0.05), Ea-BMSCs組成績比Ea組和BMSCs組好(P<0.05)。(2)腦出血各組AchE在1d時開始下降,14d時達最低值。NS組AchE含量在5、7、14d時比其他治療組高(P<0.05)；Ea-BMSCs組AchE含量,在5d時比Ea組高(P<0.05), 在7、14d時比Ea組和BMSCs組低(P<0.05)。(3)腦

5、出血各組血清SOD在1d時開始下降,在3d時達最低后快速上升,持續(xù)到14d達峰值。在3d時,Ea組SOD含量比其他治療組高(P<0.05)。NS組SOD含量在5、7、14d時比其他治療組低 (P<0.05),Ea-BMSCs組SOD含量在7、14d時比Ea組和BMSCs組高 (P<0.05),BMSCs組SOD含量在5d時比Ea組低(P<0.05)。(4)腦出血各組血清MDA含量在1d時開始上升, 在3d時達峰值后下降,在14d時達最低

6、值。在3d時,Ea組MDA含量比其他治療組低(P<0.05)。在5、7、14d時, NS 組 MDA 含量比其他治療組高 (P<0.05),Ea-BMSCs 組 MDA 含量比Ea組和BMSCs組低(P<0.05)。(5)腦出血各組SYP、PSD-95表達在1d時開始上升,Ea-BMSCs組和BMSCs組持續(xù)增高到14d達峰值,Ea組和NS組上升到7d時達峰值,隨后下降。腦出血各組GAP-43表達在1d時開始上升,7d時達峰值,隨后下降

7、。(6)在5、7、14d時, NS組SYP、GAP-43表達比其他治療組低 (P<0.05),Ea-BMSCs組SYP、GAP-43表達比Ea組和BMSCs組高(P<0.05)。(7)在3、5d時,Ea組PSD-95表達比其他治療組高(P<0.05)。NS組PSD-95表達在5、7、14d時比其他治療組低 (P<0.05)。Ea-BMSCs組PSD-95的表達在7d、14d時比Ea組和BMSCs組高(P<0.05)。(8)在腦出血治療1

8、4d時,各治療組的SOD、SYP 、PSD-95 、MDA、AchE、GAP-43、學習記憶能力與FO組和Normal組相比較仍有明顯差異(P<0.05)。 結論：(1)電針和BMSCs移植協同治療ICH,與單一電針治療或單一BMSCs移植治療比較,能顯著提高學習記憶能力,其機制可能與降低血清中AchE含量和上調SYP、PSD-95及GAP-43表達有關。(2)電針和BMSCs移植協同治療ICH,能顯著增加血清中SOD活力,減少MDA的