脂肪間充質干細胞的培養(yǎng)的實驗研究.pdf

1、目的：建立兔脂肪間充質干細胞的體外分離培養(yǎng)方法，鑒定并分析其生物學特性，并探索脂肪組織來源干細胞體外培養(yǎng)的最佳條件方法：選用新西蘭大白兔，無菌取出腹股溝脂肪，膠原酶法分離出兔脂肪干細胞，并進行體外培養(yǎng)，取2代以后的兔脂肪干細胞觀察其形態(tài)特征，并繪制細胞生長曲線及倍增時間。比較了不同膠原酶濃度、膠原酶消化時間和血清濃度對于脂肪來源干細胞體外培養(yǎng)的不同效果。結果：①兔脂肪干細胞原代及傳代細胞形態(tài)：原代及傳代的兔脂肪干細胞均呈長梭形或多邊形貼

2、壁生長，生長分化活躍。②兔脂肪干細胞的生長曲線及倍增時間：傳代的兔脂肪干細胞生長曲線呈“s”形，倍增時間為55 h。③兔脂肪干細胞的成脂分化誘導，經油紅染色的辦法，其成脂分化的陽性率為65﹪④采用0.5 m g/m l、1mg/ml、1.5mg/ml、2mg/ml四種不同膠原酶濃度進行消化后發(fā)成，在消化時間為1h時，2mg/ml組細胞總數(shù)最多，活細胞比率與其他組有統(tǒng)計學差異。在消化時間為2h時，細胞總數(shù)較1h各組均增加，同時，1mg/m