補(bǔ)中益氣湯對(duì)TGFβ-3及Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白的影響及其治療POP的機(jī)制研究.pdf

1、目的：采用細(xì)胞分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的方法，研究補(bǔ)中益氣湯對(duì)盆腔臟器脫垂的作用機(jī)制。通過對(duì)比盆腔臟器脫垂患者與正常對(duì)照組子宮主骶韌帶中TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 mRNA表達(dá)情況，明確TGFβ-3、COL1A1、COL3A1能否作為判定相關(guān)治療是否有效的評(píng)價(jià)指標(biāo)。并通過體外細(xì)胞培養(yǎng)、給藥，檢測(cè)分析TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 mRNA的表達(dá)情況，探討補(bǔ)中益氣湯治療盆腔臟器脫垂的可能機(jī)制，以及應(yīng)用補(bǔ)中益氣湯治療盆腔臟器脫

2、垂的可能性，為臨床上補(bǔ)中益氣湯治療盆腔臟器脫垂提供理論依據(jù)。
　　方法：1.選取40例行經(jīng)腹或經(jīng)陰道子宮全切患者，其中符合中、西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)盆腔臟器脫垂患者20例為研究組，非卵巢功能性腫瘤及宮頸上皮內(nèi)瘤變患者20例為正常對(duì)照組。術(shù)中取子宮主韌帶、骶韌帶各1cm*1cm，經(jīng)液氮充分研磨后提取組織RNA，實(shí)時(shí)熒光定量測(cè)定TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 mRNA的表達(dá)，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。2.選取非卵巢功能性腫瘤及宮頸上皮內(nèi)瘤變需

3、行經(jīng)腹子宮全切患者1例，術(shù)中采集子宮骶韌帶約1cm*1cm，進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)，待細(xì)胞培養(yǎng)至第4代時(shí)，于培養(yǎng)基中加入濃度分別為20g/L、10g/L、5g/L、2.5g/L、1.25g/L、0.625g/L、0.3125g/L的補(bǔ)中益氣湯。每個(gè)濃度重復(fù)3孔。加藥后第4天取加藥組及對(duì)照組細(xì)胞，提取cDNA，實(shí)時(shí)熒光定量測(cè)定TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 mRNA的表達(dá)，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果：組織RNA檢測(cè)結(jié)果：TGF

4、β-3：POP組主骶韌帶中TGFβ-3 mRNA表達(dá)水平明顯高于正常對(duì)照組；COL1A1：POP組主骶韌帶中COL1A1 mRNA表達(dá)水平明顯低于正常對(duì)照組；COL3A1：POP組主骶韌帶中COL3A1 mRNA表達(dá)水平明顯低于正常對(duì)照組。差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。主韌帶組與骶韌帶組TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 mRNA的表達(dá)無明顯差異，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。成纖維細(xì)胞RNA檢測(cè)結(jié)果：給藥后所有濃度TG

5、Fβ-3、COL1A1、COL3A1mRNA的表達(dá)均較空白對(duì)照組上升明顯，且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。且隨著濃度的上升，TGFβ-3、COL1A1、COL3A1mRNA的表達(dá)亦上升，濃度增加至2.5g/L時(shí)，3種因子的表達(dá)達(dá)峰值。隨著濃度的繼續(xù)升高，3種因子的表達(dá)隨之下降，但仍高于空白對(duì)照組。且補(bǔ)中益氣湯對(duì)TGFβ-3與COL1A1、COL3A1的調(diào)節(jié)作用相似。
　　結(jié)論：1.TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 m