ENT1調(diào)控EAAT2參與大鼠缺血再灌注后腦組織保護(hù)機(jī)制研究.pdf

1、目的：觀察大鼠缺血再灌注后腦組織病理改變、梗死體積比及腦組織內(nèi) EAAT2表達(dá)變化，明確ENT1抑制劑NBTI對(duì)EAAT2表達(dá)的影響。
　　方法：SD大鼠隨機(jī)分為正常組，假手術(shù)組，缺血再灌注3小時(shí)、6小時(shí)、24小時(shí)、72小時(shí)、1周組及ENT1抑制劑組。使用大腦中動(dòng)脈阻塞法（MCAO）建立大鼠腦缺血再灌注模型。TTC染色對(duì)腦組織梗死區(qū)域進(jìn)行染色，IPP軟件對(duì)梗死體積進(jìn)行分析，計(jì)算腦梗死相對(duì)體積比。HE染色觀察大鼠腦組織病理學(xué)改變。免

2、疫組化及Western Blotting對(duì)EAAT2的表達(dá)進(jìn)行定位及定量分析。
　　結(jié)果：TTC染色結(jié)果顯示正常組及假手術(shù)組中未見梗死灶，缺血再灌注后各時(shí)間點(diǎn)組中均見梗死灶，其梗死體積比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。HE染色結(jié)果顯示，非梗死腦組織結(jié)構(gòu)清晰，細(xì)胞核大小規(guī)則，未見異常病理性改變。而梗死側(cè)缺血區(qū)腦組織大部分神經(jīng)細(xì)胞壞死，細(xì)胞核固縮，細(xì)胞核形態(tài)不規(guī)則。Western Blotting結(jié)果顯示，在正常組及假手術(shù)中EAAT

3、2有基礎(chǔ)表達(dá)，缺血再灌注后3小時(shí)，6小時(shí)后EAAT2的表達(dá)較正常組及假手術(shù)組明顯增高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05)。隨缺血再灌注時(shí)間的延長（24小時(shí)，72小時(shí)，1周）， EAAT2表達(dá)逐漸下降。免疫組化結(jié)果顯示海馬 CA1、CA3、DG區(qū)見 EAAT2主要表達(dá)在神經(jīng)細(xì)胞包膜上。使用ENT1抑制劑NBTI后顯著減輕腦梗死體積比，與對(duì)照組比具有顯著差異（p＜0.01）。Western Blotting結(jié)果顯示，與再灌注24小時(shí)組對(duì)比，