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1、目的:本文對(duì)土槿皮乙酸體外抗人肝癌細(xì)胞(HepG2)的機(jī)制進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究。
方法:細(xì)胞計(jì)數(shù)法和細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察法確定了土槿皮乙酸是否具有抑制腫瘤細(xì)胞增殖的能力;劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)土槿皮乙酸是否具有抑制肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的能力;流式細(xì)胞儀檢測(cè)土槿皮乙酸對(duì)細(xì)胞周期的影響;熒光染色法檢測(cè)土槿皮乙酸處理后HepG2細(xì)胞中微管聚集情況;Real-time PCR檢測(cè)土槿皮乙酸對(duì)P53基因轉(zhuǎn)錄的影響;應(yīng)用Western blot方法檢測(cè)細(xì)胞凋亡和
2、周期相關(guān)蛋白的表達(dá)。
結(jié)果:細(xì)胞計(jì)數(shù)法和細(xì)胞形態(tài)觀察法確定了土槿皮乙酸時(shí)間依賴性的抑制HepG2細(xì)胞的生長(zhǎng);形態(tài)學(xué)、流式細(xì)胞術(shù)和相關(guān)蛋白表達(dá)結(jié)果確定其抑制細(xì)胞生長(zhǎng)通過(guò)細(xì)胞凋亡和G2/M周期阻滯來(lái)實(shí)現(xiàn);同時(shí)土槿皮乙酸處理能有效的抑制肝癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移;而熒光染色法檢測(cè)確定了土槿皮乙酸能夠促進(jìn)細(xì)胞骨架蛋白聚集來(lái)參與周期阻滯、凋亡以及抑制細(xì)胞轉(zhuǎn)移;對(duì)P53基因轉(zhuǎn)錄的檢測(cè)表明土槿皮乙酸降低了P53基因轉(zhuǎn)錄,說(shuō)明其在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)節(jié)細(xì)胞功能;而
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