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文檔簡介
1、背景及目的:
70多年來,白細(xì)胞在心梗后的募集、活化、炎癥調(diào)控方面不斷被研究,研究者逐漸認(rèn)識(shí)到,炎癥反應(yīng)是心梗后預(yù)防心功能惡化衰竭而調(diào)控的核心。
單核巨噬細(xì)胞是心肌梗死后重要的炎癥調(diào)控細(xì)胞,具有促炎與抑炎的雙向功能。在小鼠心臟中可以檢測(cè)到Ly6Chigh和Ly6Clow兩個(gè)單核/巨噬細(xì)胞亞群。諸多研究提示,Ly6Clow單核細(xì)胞亞群可能是一群特異性的效應(yīng)細(xì)胞,在心梗修復(fù)期發(fā)揮積極的抑制炎癥和促進(jìn)瘢痕修復(fù)的作用。
2、> 本研究擬從心肌缺血再灌注動(dòng)物模型構(gòu)建,微觀到細(xì)胞與分子水平,進(jìn)一步研究Ly6Clow單核/巨噬細(xì)胞亞群在心肌梗死后的炎癥調(diào)控作用;并結(jié)合IRAK-M分子的研究現(xiàn)狀,通過磁珠分選與流式細(xì)胞儀的方法對(duì)采集細(xì)胞進(jìn)行分選、鑒定,進(jìn)一步嘗試對(duì)IRAK-M分子與Ly6Clow單核/巨噬細(xì)胞亞群在心梗后炎癥抑制作用上的關(guān)系做出探索。上述研究將有助于闡明Ly6Clow單核細(xì)胞亞群的心臟保護(hù)作用,尋找心肌梗死后促進(jìn)心臟愈合的特異性靶細(xì)胞和相應(yīng)機(jī)制,
3、為改善心肌梗死的預(yù)后提供新治療靶點(diǎn)的研究方向。
方法:
本研究以心梗后7日取得的小鼠心臟制備單細(xì)胞懸液,通過磁珠分選與流式細(xì)胞儀的方法對(duì)其加以分離、鑒定,通過急性心梗(缺血再灌注)模型與未手術(shù)、IRAK-M基因敲除與野生型的雙重對(duì)照(具體分組見下表),探索心梗后這一特定階段的炎癥調(diào)控機(jī)制。
表1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組情況(除去手術(shù)相關(guān)死亡動(dòng)物數(shù)量)┏━━━━━━━━━┳━━━━━┳━━━━━━┓┃實(shí)驗(yàn)動(dòng)物/只┃心梗┃
4、未心梗┃┣━━━━━━━━━╋━━━━━╋━━━━━━┫┃基因敲除組┃6┃5┃┣━━━━━━━━━╋━━━━━╋━━━━━━┫┃野生型組┃5┃5┃┗━━━━━━━━━┻━━━━━┻━━━━━━┛
結(jié)果:
本研究發(fā)現(xiàn),IRAK-M基因敲除組小鼠中,心梗組較未心梗組CD11 b+F4/80-單核細(xì)胞數(shù)量顯著性增加,而其他組間細(xì)胞數(shù)量比較均無顯著性差異。
另外,在CD11b+F4/80+的巨噬細(xì)胞或者CD11b+
5、F4/80-的單核細(xì)胞中,心梗小鼠IRAK-M基因敲除組較野生型組的Ly6Clow細(xì)胞亞群比例顯著減少。野生型小鼠的心梗組與未心梗組相比,Ly6Clow單核細(xì)胞比例顯著增高。
在各組間對(duì)比,M2型細(xì)胞總數(shù)量未達(dá)到顯著性差異,同時(shí)在Ly6Chigh巨噬細(xì)胞中,M2型所占比例各組間無顯著差異。而在Ly6Clow巨噬細(xì)胞中,IRAK-M基因敲除小鼠心梗組較未心梗組M2型巨噬細(xì)胞所占比例顯著增多,心梗小鼠IRAK-M基因敲除組較野生型
6、組M2型巨噬細(xì)胞所占比例顯著減少。
本研究發(fā)現(xiàn),在Ly6Clow巨噬細(xì)胞中,心梗小鼠IRAK-M基因敲除組與野生型組相比較,IL-1RⅡ表達(dá)顯著減低,同時(shí)在Ly6Clow單核細(xì)胞中,心梗小鼠IRAK-M基因敲除組與野生型組相比較,IL-1RⅡ表達(dá)亦顯著減低。
結(jié)論:
IRAK-M在心梗后的炎癥抑制環(huán)境中,能夠調(diào)控單核/巨噬細(xì)胞的表型與功能,與Ly6Clow單核/巨噬細(xì)胞的數(shù)量與功能密切相關(guān)。同時(shí),IRAK-
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