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1、脈沖電場(chǎng)(pulsed electric fileds, PEFs),是一種融合多學(xué)科的新型腫瘤治療方法,具有獨(dú)特的生物電效應(yīng),目前被廣泛用于腫瘤治療領(lǐng)域的研究。其中高強(qiáng)度脈沖電場(chǎng)(KV/cm場(chǎng)強(qiáng),μs~ns數(shù)量級(jí)脈寬的脈沖電場(chǎng))備受研究者們青睞,它以不可逆性電穿孔( irreversible electroporation, IRB)效應(yīng),選擇性誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡,可實(shí)現(xiàn)腫瘤組織靶向消融治療。然而機(jī)體存在電壓耐受現(xiàn)象,高強(qiáng)度脈沖電場(chǎng)(h
2、igh-intensity pulsed electric field,HPEF)對(duì)具有自主心電活動(dòng)的電場(chǎng)敏感組織的安全性問(wèn)題,成為其臨床應(yīng)用的瓶頸。相對(duì)高壓脈沖電場(chǎng),低壓脈沖電場(chǎng)(low-voltage electric current pulse,LVECP)可作為一種新的選擇。本課題組前期實(shí)驗(yàn)研究證實(shí):不同刺激參數(shù)組合對(duì)心肌組織有不同程度影響。因此,本實(shí)驗(yàn)主要從以下兩方面進(jìn)行研究:1、脈沖電場(chǎng)對(duì)荷黑素瘤小鼠腫瘤的抑制效應(yīng);2、脈沖
3、電場(chǎng)對(duì)荷黑素瘤小鼠心肌損傷的影響。
第一部分:脈沖電場(chǎng)對(duì)荷黑素瘤小鼠腫瘤的抑制效應(yīng)
目的:觀(guān)察脈沖電場(chǎng)對(duì)荷黑素瘤小鼠腫瘤生長(zhǎng)的抑制效應(yīng)。
方法:將B16F10黑素瘤細(xì)胞接種于BALB/c小鼠背部皮下組織,成功構(gòu)建荷黑素瘤小鼠模型,隨機(jī)分為4組:對(duì)照組(n=10)和治療組(n=30)。治療組分別采用1ms、3ms、5ms脈沖寬度,100V/cm場(chǎng)強(qiáng)、10Hz頻率的脈沖電場(chǎng),10min/d連續(xù)刺激15d。用游標(biāo)
4、卡尺測(cè)定腫瘤體積大小,HE染色光鏡下觀(guān)察腫瘤組織病理學(xué)改變,采用 qRT-PCR測(cè)定腫瘤組織中PCNA mRNA的表達(dá)水平,免疫熒光組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)腫瘤組織PCNA蛋白的表達(dá)情況。
結(jié)果:電刺激第15天后,各治療組腫瘤體積分別為(238.4±307.2mm3)、(81.9±63.4 mm3)、(63.9±83.9 mm3),均較對(duì)照組(506.2±341.7mm3)減小(P<0.05);與對(duì)照組比較,光鏡觀(guān)察發(fā)現(xiàn)治療組瘤細(xì)胞胞
5、質(zhì)內(nèi)充滿(mǎn)黑素顆粒,腫瘤細(xì)胞出現(xiàn)變性、壞死;3ms組、5ms組PCNA mRNA和蛋白表達(dá)均降低(P<0.05,P<0.01)。
結(jié)論:脈沖電場(chǎng)可抑制黑素瘤生長(zhǎng),這與抑制腫瘤細(xì)胞增殖有關(guān)。
第二部分:脈沖電場(chǎng)對(duì)荷黑素瘤小鼠心肌損傷的影響
目的:觀(guān)察脈沖電場(chǎng)對(duì)心臟電活動(dòng)和心肌細(xì)胞的影響。
方法:將40只荷黑素瘤小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、治療組(1ms、3ms、5ms組),治療組給予100V/cm場(chǎng)強(qiáng)、10H
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