SAB,SAC及其分子藥對配伍對HSA誘導HK-2細胞CCL2，CCL3表達量的影響.pdf

1、目的:研究SAB, SAC及其分子藥對配伍對HSA誘導腎小管上皮細胞過程中CCL2,CCL3表達的影響。
　　方法:將體外培養(yǎng)的HK-2細胞隨機分為6組：①正常組②人血清白蛋白組(簡稱模型組)、③PDGF-C抗體組(簡稱抗體組)④丹酚酸B組⑤丹酚酸C組⑥丹酚酸B, C按1:1組分配伍組(簡稱:配伍組)。同步化24h后，除正常組外，其余各組均給予HSA誘導?？贵w組、丹酚酸B組、丹酚酸C組、配伍組（統(tǒng)稱為治療組）分別加入相應藥物共同培

2、養(yǎng)，于24h、48h、72h分組收集細胞。采用Western Blot、免疫細胞化學及免疫熒光技術檢測HK-2細胞PDGF-C、PDGFR-α、CCL2和CCL3的定位及表達水平。分別采用WST-1法、DTNB法和TBA法測定SOD、GSH及 MDA的含量。
　　結(jié)果：1. PDGF-C的檢測結(jié)果1）免疫細胞化學檢測結(jié)果:PDGF-C陽性表達為棕黃顆粒，表達部位主要位于HK-2細胞胞質(zhì)。2）WB檢測結(jié)果：與模型組相比24h、48h

3、及72h三個時間點治療組PDGF-C相對表達量明顯減少（P<0.05）。2. PDGFR-α的檢測結(jié)果1）免疫細胞化學檢測結(jié)果：PDGFR-α陽性表達為棕黃顆粒，表達部位主要位于HK-2細胞胞質(zhì)。2）WB檢測結(jié)果：與模型組相比24h、48h及72h治療組PDGFR-α相對表達量明顯減少（P<0.05），其中，72h時間點抗體組及配伍組PDGFR-α相對表達量較丹酚酸B、C組顯著降低（P<0.05）3. CCL2的檢測結(jié)果1）免疫熒光化學

4、檢測結(jié)果：CCL2陽性表達為綠色熒光，表達部位主要位于HK-2細胞胞質(zhì)。2）WB檢測結(jié)果：與模型組相比，24h、48h及72h三個時間點各治療組CCL2相對表達量均明顯減少（P<0.05），其中，72h時間點抗體組及配伍組CCL2相對表達量較丹酚酸C組顯著降低（P<0.05）。4. CCL3檢測結(jié)果1）免疫熒光化學檢測結(jié)果：CCL3陽性表達為綠色熒光，表達部位主要位于HK-2細胞胞質(zhì)。2） WB檢測結(jié)果：與模型組相比，24h、48h和7

5、2h三個時間點各治療組CCL3蛋白相對表達明顯減少（P<0.05）。5. SOD、GSH和MDA檢測結(jié)果：與模型組相比，24h、48h及72h各治療組SOD和GSH含量明顯升高(P<0.05)，各治療組內(nèi)比較，配伍組SOD和GSH含量均較其他治療組明顯升高(P<0.05)。與模型組相比，24h、48h及72h各治療組MDA含量明顯降低(P<0.05)，配伍組MDA含量較其他治療組明顯降低(P<0.05)。
　　結(jié)論：丹酚酸B、C及