針刺足三針通過CO途徑對大鼠結(jié)腸吻合術(shù)后ICCs修復(fù)的影響.pdf

1、目的:
　　腹部手術(shù)后，常出現(xiàn)術(shù)后胃腸功能障礙，導(dǎo)致一系列的臨床癥狀。在促進術(shù)后胃腸功能恢復(fù)的臨床研究中，大量的臨床研究表明針刺能減輕術(shù)后胃腸功能障礙的程度，促進胃腸功能恢復(fù)，目前在臨床上廣泛應(yīng)用。通過前期研究發(fā)現(xiàn)，術(shù)后胃腸功能的恢復(fù)可能與胃腸道ICCs修復(fù)再生存在密切的聯(lián)系。CO氣體信號通路是ICCs修復(fù)再生過程中一條重要的途徑，CO是介導(dǎo)胃腸道平滑肌舒張的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，當(dāng)神經(jīng)元受刺激時，HO合成CO并釋放，介導(dǎo)神經(jīng)傳導(dǎo)。本課

2、題通過觀察針刺“靳三針”穴組中“足三針”對結(jié)腸吻合術(shù)后SD大鼠胃腸道CO氣體信號通路的影響，探索針刺“足三針”對術(shù)后胃腸功能障礙SD大鼠胃腸功能恢復(fù)的作用機制。
　　方法:
　　將SD大鼠隨機分為3組:正常組、模型組、針刺組，模型組及針刺組再按干預(yù)時間的不同分為3天組、5天組、10天組。
　　模型組:行結(jié)腸吻合術(shù)造模。麻醉后沿腹白線于中下腹部切開腹部，與盲腸下端2cm處剪短，縫合結(jié)腸，依次縫合腹膜、肌層和皮膚，術(shù)后不予

3、針刺。
　　針刺組:造模同模型組，術(shù)后按干預(yù)時間不同予以針刺干預(yù)。
　　小腸推進率的測量:SD大鼠取材前，用灌胃器抽取1ml墨水對大鼠進行灌胃，灌胃30min后頸椎脫臼處死，用組織剪剪開腹部，充分暴露腸道，仔細(xì)剝離大腸、小腸，量取小腸全長及幽門至墨水遠(yuǎn)端的距離。參照公式:小腸推進率=（墨水行進長度/小腸總長度）×100％，計算每只大鼠的小腸推進率。
　　CO、HO-1、HO-2含量的測定:將SD大鼠脫臼處死后，截取盲腸

4、下端吻合口約1cm長，將腸組織清洗干凈，沿縱軸分為三部分，分別用于檢測HO-1、HO-2、CO和電鏡觀察;按照不同的標(biāo)本處理方法將腸組織做前期處理。使用ELISA法測定HO-1、HO-2活性，生化法測定CO含量;使用電鏡觀察Caja1細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)。
　　結(jié)果:
　　1.小腸推進率測定結(jié)果:比較各組大鼠小腸推進率，正常組與5天針刺組、10天針刺無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，3天模型組與5天模型組無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)，

5、3天針刺組與10天模型組無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)，5天模型組與10天模型組有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)，其余各組相比較均有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。
　　2.HO-1活性測定結(jié)果:與3天正常組比較，3天模型組結(jié)果有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01)，3天針刺組結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05);與3天模型組比較，5天正常組、5天模型組、5天針刺組、10天正常組、10天模型組、10天針刺組結(jié)果有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01)，3

6、天針刺組結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05);與3天針刺組比較，5天正常組、5天針刺組、10天正常組、10天模型組結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05);余結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　3.HO-2活性的測定結(jié)果:與正常組比較，3天模型組、3天針刺組、5天模型組、5天針刺組、10天模型組、10天針刺組結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);與3天模型組比較，3天針刺組結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，5天模型組、5天針刺組、10天模型組、10天針刺組結(jié)

7、果有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);與3天針刺組比較，5天模型組、5天針刺組、10天模型組、10天針刺組有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);余無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　4.CO含量的測定結(jié)果:與正常組比較，3天模型組、3天針刺組、5天模型組結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01);與3天模型組比較，3天針刺組、5天模型組5天針刺組、10天模型組、10天針刺組結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01);與3天針刺組比較，5天針刺組、10天模型組、10天針刺組結(jié)果有統(tǒng)

8、計學(xué)差異(P＜0.01);與5天模型組比較，5天針刺組、10天模型組結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01)。余結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)差異。
　　5.電鏡Caja1細(xì)胞結(jié)果:
　　(1).正常組:Caja1細(xì)胞多成梭形，細(xì)胞核清晰，呈卵圓形，細(xì)胞內(nèi)染色質(zhì)均勻、清晰，細(xì)胞核周圍胞質(zhì)較少，胞內(nèi)細(xì)胞器如:線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等發(fā)育良好;胞漿內(nèi)中間絲清楚，數(shù)量較多，多分布在細(xì)胞核周圍;基底膜完整;神經(jīng)突觸連接清楚。
　　(2).模型組:

9、r>　　①模型3天組:Caja1細(xì)胞凸起明顯減少，胞漿少，胞漿內(nèi)出現(xiàn)數(shù)量較多的空泡;細(xì)胞器數(shù)量明顯減少，細(xì)胞器存在廣泛病變，線粒體腫脹明顯，線粒體嵴斷裂;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張明顯，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脫顆粒;基底膜不完整。
　?、谀Ｐ?天組:Caja1細(xì)胞形狀不規(guī)則，細(xì)胞核固縮，異染色質(zhì)趨邊，細(xì)胞內(nèi)胞漿稍豐富，細(xì)胞結(jié)構(gòu)稍清晰;線粒體腫脹，結(jié)構(gòu)不清;中間絲數(shù)量稍多，基底膜不完整。
　?、勰Ｐ?0天組:細(xì)胞內(nèi)胞漿豐富，細(xì)胞器數(shù)量較多，部分結(jié)構(gòu)不清晰

10、;線粒體部分腫脹，可見少量溶酶體;部分粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脫顆粒，中間絲清晰，基底膜稍完整。
　　(3).針刺組:
　?、籴槾?天組:細(xì)胞內(nèi)胞漿豐富，細(xì)胞器數(shù)量較多，結(jié)構(gòu)較清晰;線粒體部分腫脹;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張不明顯;中間絲清晰，基底膜欠完整。
　?、卺槾?天組:Caja1細(xì)胞形狀規(guī)則，多為梭形，細(xì)胞內(nèi)染色質(zhì)較均勻，細(xì)胞核周圍胞質(zhì)豐富，細(xì)胞器數(shù)量較多，結(jié)構(gòu)清楚，線粒體數(shù)量較多，結(jié)構(gòu)清晰;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)無擴張;可見少量高爾基體、溶酶體;基底膜較

11、完整。
　?、坩槾?0天組:Caja1細(xì)胞多成梭形，細(xì)胞核清晰，呈卵圓形，細(xì)胞內(nèi)染色質(zhì)均勻、清晰，細(xì)胞核周圍胞質(zhì)較少，胞內(nèi)細(xì)胞器發(fā)育良好;胞漿內(nèi)中間絲清楚，數(shù)量較多，多分布在細(xì)胞核周圍;基底膜完整;神經(jīng)突觸連接清楚。
　　結(jié)論:
　　1.針刺能改善胃腸功能障礙SD大鼠的小腸推進率，針刺組小腸蠕動恢復(fù)時間明顯比模型組恢復(fù)時間縮短。
　　2.針刺能降低術(shù)后應(yīng)激增高的胃腸道HO-1、HO-2活性，使CO合成量減少，CO