中藥南蛇藤提取物治療大鼠肝纖維化的實驗研究.pdf

1、目的:建立SD大鼠的肝纖維化模型，觀察中草藥南蛇藤莖乙酸乙酯提取物(C.orbiculatusethyl acetate extracts，COE)對肝纖維化大鼠的治療作用，并初步探索其作用機(jī)制。
　　方法:SD大鼠，70只，據(jù)體重隨機(jī)分為正常組（10只）、陰性對照組（10只）、實驗組（50只）。正常組不處理，陰性對照組腹腔注射生理鹽水（0.75 mL/kg），實驗組經(jīng)腹腔注射15％(Ⅴ/Ⅴ)四氯化碳液體石蠟油(0.75mL/kg

2、)，每周三次。6w末，隨機(jī)處死大鼠，光鏡下觀察其肝臟組織病理改變，確認(rèn)成功建立肝纖維化模型。將實驗組大鼠隨機(jī)分為5組，即模型組、南蛇藤提取物組（低、中、高）及丹參酮組，每組10只。模型組以含1％ DMSO的生理鹽水灌胃。將南蛇藤提取物濃度設(shè)置為12.5、25、50mg/kg，灌胃，連續(xù)20 d。丹參酮組腹腔注射20 mg/kg丹參酮ⅡA鈉，連續(xù)3d。治療結(jié)束后，收集血清，ELISA檢測血清內(nèi)各指標(biāo)濃度:肝功能指標(biāo):白蛋白(ALB)、谷丙

3、轉(zhuǎn)氨酶(ALT);肝纖四項指標(biāo):Ⅲ型前膠原(PCⅢ)、Ⅳ型膠原(CⅣ)、透明質(zhì)酸酶(HA)、層粘連蛋白(LN);細(xì)胞因子指標(biāo):轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)。制作石蠟切片，通過HE染色，觀察大鼠肝組織的病理改變。
　　結(jié)果:顯微鏡下，實驗組大鼠肝臟組織結(jié)構(gòu)出現(xiàn)異常，肝小葉結(jié)構(gòu)被破壞，匯管區(qū)及中央靜脈可發(fā)現(xiàn)有大量纖維結(jié)締組織增生，肝細(xì)胞水腫，排列紊亂，大部分變性，部分可見壞死。說明成功構(gòu)建肝纖維化

4、大鼠模型。肝功能指標(biāo)檢測:與模型組比較，而COE低劑量組ALB，ALT含量改變不明顯，無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);COE中、高劑量組及丹參酮組可使血清中ALB含量升高，ALT含量下降，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。肝纖四項指標(biāo)檢測:與模型組比較，COE低劑量組PCⅢ、CⅣV、HA、LN血清水平無明顯差異(P＞0.05)，COE中、高劑量組及丹參酮組PCⅢ、CⅣV、HA、LN血清含量均降低，具有顯著性差異(P＜0.05)。細(xì)胞因

5、子檢測指標(biāo):與模型組比較，COE低劑量組TGF-β1、TNF-α血清水平無明顯差異(P＞0.05)，COE中、高劑量組及丹參酮組TGF-β1、TNF-α血清含量明顯降低，具有顯著性差異(P＜0.05)。HE染色結(jié)果:與模型組相比， COE低劑量組對破壞的肝小葉和變性、壞死的肝細(xì)胞未有明顯改變，COE中、高劑量組及丹參酮組可見清晰的肝小葉結(jié)構(gòu)，肝細(xì)胞包繞中央靜脈呈放射狀存在。肝小葉的破壞程度、肝細(xì)胞的壞死程度、纖維組織的增生均有所降低。<