白樺脂醇在肝損傷小鼠體內(nèi)藥動學(xué)及組織分布研究.pdf

1、目的:建立測定小鼠生物樣品中白樺脂醇濃度的RP-HPLC方法，研究小鼠經(jīng)腹腔注射白樺脂醇后的藥代動力學(xué)特征及組織分布規(guī)律，為白樺脂醇的后期研發(fā)和藥物臨床合理應(yīng)用提供參考性依據(jù)。
　　方法:1.生物樣品處理及色譜條件:小鼠生物樣品采用液液萃取法，按一定比例加入乙酸乙酯提取血清及組織勻漿液中的白樺脂醇。以齊墩果酸為內(nèi)標(biāo)，采用RP-HPLC法測定生物樣品中藥物分布濃度，色譜條件:色譜柱Shim-pack VP-ODS(150 mm×4.

2、6mm，5μm);流動相甲醇-水(85∶15)，流速0.8mL·min-1，柱溫30℃，檢測波長210nm。2.分組及造模方式:小鼠分為正常組及造模組，造模組在給藥前灌胃給予242mg/kg對乙酰氨基酚（APAP）造成小鼠肝損傷。兩組均以75mg/kg劑量腹腔注射白樺脂醇，給藥后于不同時間點(diǎn)處死小鼠并采血以測定其血藥濃度，并取出組織。3.血液樣品中藥動學(xué)參數(shù)計算及組織分布考察:血液樣品測定濃度結(jié)果經(jīng)DAS2.1.1程序軟件處理擬合房室模

3、型，計算藥代動力學(xué)參數(shù)。在與血液樣品相同色譜條件下檢測組織樣品中藥物濃度，探討經(jīng)腹腔注射給藥后白樺脂醇在小鼠心、肝、脾、肺、腎分布情況。
　　結(jié)果:1.血液中白樺脂醇濃度:血液中白樺脂醇在1.0-50.0μg·mL-1濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系(R2=0.9994);峰面積比日內(nèi)精密度RSD值≤8.15％，日間精密度RSD值≤8.07％;血清樣品在24小時內(nèi)濃度穩(wěn)定，RSD≤7.01％，反復(fù)凍融亦穩(wěn)定，RSD值≤9.22;平均回收

4、率為107.37％。2.組織中白樺脂醇濃度:心中白樺脂醇在2.0-100.0μg·mL-1濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系(R2=0.9991)、肝中白樺脂醇在1.0-250.0μg·mL-1濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系(R2=0.9987)、脾和肺中白樺脂醇在1.0-150.0μg·mL-1濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系（R2值分別為0.9994和0.9993）、腎中白樺脂醇在1.0-200.0μg·mL-1濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系(R2=0.

5、9991)、混合組織中白樺脂醇在1.0-100.0μg·mL-1濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系(R2=0.9980);日內(nèi)精密度RSD值≤5.67％，日間精密度RSD值≤5.02％;組織樣品在24小時內(nèi)濃度穩(wěn)定，RSD≤6.37％，反復(fù)凍融亦穩(wěn)定，RSD值≤1.40。3.藥代動力學(xué)參數(shù)及組織分布:根據(jù)各時間點(diǎn)藥物濃度進(jìn)行擬合，選擇二室模型，分別計算正常組與造模組各藥動學(xué)參數(shù)。腹腔注射白樺脂醇后在體內(nèi)心、肝、脾、肺、腎均有分布。給藥45-50

6、min后，白樺脂醇可達(dá)到最高吸收，濃度以肝組織最高，其余依次為腎、脾、肺，心中藥物濃度相對較低。
　　結(jié)論:測定小鼠生物樣品中白樺脂醇濃度的RP-HPLC法，方法簡單、準(zhǔn)確可靠，專屬性強(qiáng)，滿足對白樺脂醇在小鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)和組織分布的研究。腹腔注射白樺脂醇在體內(nèi)吸收、消除較快，代謝迅速，擬合分析為藥代動力學(xué)的二室模型。白樺脂醇在小鼠體內(nèi)各組織中的分布相對較廣，且迅速，代謝消除較快。本研究采集的心、肝、脾、肺、腎主要組織中均檢測出