空間訓(xùn)練促進(jìn)Aβ1-42注射大鼠海馬新生細(xì)胞的短期存活和神經(jīng)元樣分化的研究.pdf

1、背景:
　　阿爾茨海默病（Alzheimer’s disease, AD）是最常見(jiàn)的癡呆類(lèi)型，其主要表現(xiàn)為記憶和其他認(rèn)知功能的進(jìn)行性下降，目前尚缺乏有效的治療手段。認(rèn)知刺激療法對(duì)臨床患者認(rèn)知功能有改善作用，但分子機(jī)制不清楚。
　　神經(jīng)發(fā)生持續(xù)性存在于哺乳動(dòng)物腦內(nèi)，主要位于海馬齒狀回（DG）的顆粒細(xì)胞下區(qū)和側(cè)腦室內(nèi)壁的室管膜下區(qū)。齒狀回的神經(jīng)發(fā)生在海馬介導(dǎo)的學(xué)習(xí)和記憶中發(fā)揮著重要作用。神經(jīng)發(fā)生的損傷與AD轉(zhuǎn)基因鼠和AD患者的認(rèn)

2、知損傷有著強(qiáng)烈的相關(guān)性。在正常動(dòng)物中研究發(fā)現(xiàn)，空間訓(xùn)練可影響海馬新生細(xì)胞的發(fā)生和命運(yùn)，然而在AD動(dòng)物模型中，空間訓(xùn)練對(duì)海馬齒狀回的神經(jīng)發(fā)生有著怎樣的影響，目前并不清楚。
　　目的:
　　本研究旨在對(duì)AD動(dòng)物模型進(jìn)行空間訓(xùn)練干預(yù)，探討空間訓(xùn)練對(duì)AD模型鼠海馬DG區(qū)神經(jīng)發(fā)生的影響。
　　方法:
　　利用Aβ1-42寡聚體側(cè)腦室定位注射建立AD動(dòng)物模型；利用Morris水迷宮進(jìn)行連續(xù)6天的空間訓(xùn)練；通過(guò)胸腺嘧啶類(lèi)似物—

3、—5'-溴脫氧尿嘧啶核苷（BrdU）腹腔注射標(biāo)記3個(gè)時(shí)間點(diǎn)——訓(xùn)練前1周、訓(xùn)練早期1-4天和訓(xùn)練晚期5-6天新生的神經(jīng)細(xì)胞；采用免疫組化方法對(duì)BrdU免疫陽(yáng)性細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，檢測(cè)DG區(qū)新生細(xì)胞的存活；采用免疫熒光方法對(duì)Ki67免疫陽(yáng)性細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，檢測(cè)DG區(qū)細(xì)胞的增殖；通過(guò)成熟神經(jīng)元標(biāo)志物NeuN和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物GFAP分別與BrdU進(jìn)行免疫熒光雙標(biāo)，檢測(cè)新生細(xì)胞的遷移和分化；通過(guò)條件性恐懼記憶實(shí)驗(yàn)檢測(cè)空間訓(xùn)練對(duì)AD模型鼠記憶能力的改

4、善作用。
　　結(jié)果:
　　通過(guò)BrdU免疫陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)發(fā)現(xiàn)，在空間訓(xùn)練結(jié)束后24小時(shí)檢測(cè)，空間訓(xùn)練增加了AD模型鼠訓(xùn)練前1周、訓(xùn)練早期和訓(xùn)練晚期產(chǎn)生的新生細(xì)胞的存活；而在BrdU標(biāo)記后28天檢測(cè)，AD模型鼠訓(xùn)練前1周、訓(xùn)練早期和訓(xùn)練晚期新生細(xì)胞的存活在訓(xùn)練組與未訓(xùn)練組均沒(méi)有差異。通過(guò)Ki67免疫陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)發(fā)現(xiàn)，在訓(xùn)練結(jié)束后24小時(shí)和28天，空間訓(xùn)練均顯著增加了AD模型鼠神經(jīng)細(xì)胞的增殖。通過(guò)BrdU/NeuN和BrdU/GF

5、AP免疫熒光雙標(biāo)對(duì)雙陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)發(fā)現(xiàn)，在BrdU標(biāo)記后28天，空間訓(xùn)練對(duì)AD模型鼠和對(duì)照鼠新生神經(jīng)細(xì)胞從顆粒細(xì)胞下區(qū)向顆粒細(xì)胞層的遷移沒(méi)有影響；在BrdU標(biāo)記后28天，空間訓(xùn)練促進(jìn)了AD模型鼠訓(xùn)練前1周、訓(xùn)練早期和訓(xùn)練晚期三個(gè)階段產(chǎn)生的新生神經(jīng)細(xì)胞更多地轉(zhuǎn)化為成熟神經(jīng)元，而并未改變新生細(xì)胞向神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的分化。條件性恐懼記憶實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，空間訓(xùn)練增加了AD模型鼠的近期條件恐懼記憶能力，而對(duì)遠(yuǎn)期恐懼記憶能力沒(méi)有影響。
　　結(jié)論: