新生大鼠脊髓神經(jīng)干細胞定向分化神經(jīng)元的β-tubulin時空表達及相關因素研究.pdf

1、神經(jīng)干細胞具有增殖和分化能力,為神經(jīng)系統(tǒng)損傷和退行性病變的治療帶來了希望,其目前的關鍵問題是神經(jīng)干細胞定向分化的誘導.該研究旨在體外誘導神經(jīng)干細胞定向分化為膽堿能神經(jīng)元;探討神經(jīng)干細胞定向分化過程中突起生長機制.該研究分3步進行.第一,分離、培養(yǎng)新生大鼠脊髓神經(jīng)干細胞,加入NGF、IGF-1、胰島素,觀察此誘導因素是否使新生鼠脊髓神經(jīng)干細胞定向分化為膽堿能神經(jīng)元.第二,探討細胞骨架蛋白-β-微管蛋白(β-tubulin)在脊髓神經(jīng)干細胞

2、分化為神經(jīng)元過程中的表達及意義.第三,跟蹤觀察突起生長錐中高表達的GAP-43在神經(jīng)干細胞定向分化過程中的表達變化,同時用共焦激光掃描顯微鏡(Confocal Laser ScanningMicroscope,CLSM)觀察β-tubulin和GAP-43在突起生長中的相互關系.結論1.NGF和IGF-Ⅰ的協(xié)同作用,使脊髓神經(jīng)干細胞定向分化為神經(jīng)元,特別是定向分化成膽堿能神經(jīng)元.其機制可能是IGF-Ⅰ與NGF能促進神經(jīng)元前體細胞的增殖,

3、并相互之間存在協(xié)同關系.2.神經(jīng)干細胞定向分化為神經(jīng)元過程中,β-tubulin隨著細胞的成熟,從無到有,其分布與排列也日趨規(guī)則.考慮β-tubulin在突起內合理地分布,可能是神經(jīng)干細胞分化過程中突起生長的重要因素.3.β-catenin也與神經(jīng)干細胞的分化與突起的生長有密切的相關性.推測β-catenin通過細胞骨架系統(tǒng),間接促進突起生長.4.脊髓神經(jīng)干細胞定向分化過程中,β-tubulin與GAP-43存在共同表達,其空間分布與表