人胚胎干細胞向神經前體細胞誘導分化的研究.pdf

1、人胚胎干細胞的研究與人類的健康和醫(yī)學有著密切的關系,利用胚胎干細胞的多分化潛能對受損和退化的細胞或組織進行修補,有希望為神經系統(tǒng)疾病細胞替代性治療提供理想的細胞來源,有利于深入研究體外條件下定向誘導胚胎干細胞分化為神經種系細胞的調控機理。本研究包括二方面工作:(一)利用臨床體外受精多余的囊胚建立人胚胎干細胞系。用鏈蛋白酶消化去除囊胚的透明帶,然后直接機械分離出內細胞團,接種到小鼠胚胎成纖維細胞飼養(yǎng)層上,在hES細胞培養(yǎng)液中進行培養(yǎng),成功

2、建立人胚胎干細胞系并命名為H14;通過對人胚胎干細胞系H14的特征進行鑒定,發(fā)現其應具備的干細胞特征:自我更新能力、多向分化潛能和核型正常等。(二)建立人胚胎干細胞系H14之后,我們開展了人胚胎干細胞體外定向誘導分化為神經前體細胞的研究。通過實驗比較了bFGF和Noggin兩種生長因子對人胚胎干細胞系H14體外誘導分化為神經前體細胞的效率的差異,并利用細胞免疫熒光染色和RT-PCR進行了相關鑒定。結果提示人胚胎干細胞分化所得到的神經前體