洋金花中東莨菪堿的提取分離及其旋光穩(wěn)定性的研究.pdf

1、東莨菪堿是一種托品烷類生物堿，其具有散瞳、解痙、抗膽堿、麻醉、鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜等作用，國(guó)內(nèi)外對(duì)其純品需求量非常的大。天然手性東莨菪堿的制備主要以洋金花為原料，其種植環(huán)境較為廣泛，但原料中生物堿的含量及相對(duì)比例差異非常大，若將目前的提取純化方法應(yīng)用于一些低含量的原料，則存在提取率低、回收率低、富集性差等不足，從而影響后續(xù)分離純化，為此，開發(fā)一種提取率高、富集性好、回收率高的新工藝，以獲得高純東莨菪堿（純度＞99％），對(duì)洋金花的深度開發(fā)具有重要意

2、義。
　　本研究以安徽皖北地區(qū)種植的道地洋金花為原料，進(jìn)行洋金花中東莨菪堿的提取及分離純化的工藝參數(shù)優(yōu)化，首先進(jìn)行東莨菪堿純品的穩(wěn)定性研究，再進(jìn)行提取工藝、分離工藝等參數(shù)的優(yōu)選，并將提高東莨菪堿旋光穩(wěn)定性的影響因子與提取、分離過程相結(jié)合，實(shí)現(xiàn)從源頭上開始控制目標(biāo)物質(zhì)的穩(wěn)定性。
　　本論文通過系統(tǒng)研究，主要結(jié)果如下:
　　(1)在穩(wěn)定性考察方面:通過對(duì)東莨菪堿在不同pH值酸堿溶液，不同溫度，不同光照強(qiáng)度下比旋光度的變化情

3、況，發(fā)現(xiàn)東莨菪堿在中性偏酸性條件下相對(duì)更加穩(wěn)定，在強(qiáng)酸中也會(huì)產(chǎn)生少量變旋和降解，而在堿性條件下會(huì)快速發(fā)生變旋和降解，且堿性越強(qiáng)，越容易降解;東莨菪堿在低溫環(huán)境下較為穩(wěn)定，當(dāng)溫度超過80℃后，會(huì)產(chǎn)生快速的變旋和降解反應(yīng);東莨菪堿在避光條件下較為穩(wěn)定，當(dāng)照度增加時(shí)，隨著儲(chǔ)存時(shí)間的延長(zhǎng)，東莨菪堿會(huì)逐漸變旋和降解;相同條件下，東莨菪堿在高濃度時(shí)比低濃度時(shí)更容易發(fā)生變旋反應(yīng)。因此，在制備過程中，應(yīng)根據(jù)情況選擇對(duì)東莨菪堿旋光活性影響小的條件進(jìn)行，在

4、儲(chǔ)存過程中，可采取用棕色瓶避光低溫保存、轉(zhuǎn)化為東莨菪堿鹽的形式進(jìn)行儲(chǔ)存等方式提高東莨菪堿的旋光穩(wěn)定性。
　　(2)在提取工藝研究方面:通過對(duì)常規(guī)酸水提取法、常規(guī)乙醇提取法和超聲波輔助二氯甲烷提取法三種提取方法的對(duì)比，發(fā)現(xiàn)超聲波輔助二氯甲烷提取法具有更好的提取效果，不僅提取率高，而且工藝簡(jiǎn)單，便于工業(yè)化生產(chǎn)。接著采用正交法對(duì)超聲波輔助二氯甲烷提取法進(jìn)行工藝優(yōu)化，得到東莨菪堿最佳提取工藝條件為:原料與氨水質(zhì)量體積比1∶2、超聲波功率1

5、80W、料液比1∶10、提取溫度25℃、提取時(shí)間30min、提取次數(shù)2次。在此最佳條件下，東莨菪堿的得率為0.091％，回收溶劑后浸膏中東莨菪堿含量為3.02％。此步驟雖然使用了大量的氨水，但是經(jīng)驗(yàn)證，其對(duì)最終產(chǎn)物的旋光性并無顯著的影響。
　　(3)在分離純化研究方面:建立了一種結(jié)合液液萃取、大孔樹脂純化及結(jié)晶技術(shù)的從洋金花粗提物中分離純化東莨菪堿的方法，其具有高毒性有機(jī)溶劑用量小、獲得產(chǎn)品純度及回收率高、富集及純化效果強(qiáng)、樣品處

6、理量大、工藝簡(jiǎn)單可行、可適用于低含量原料等諸多優(yōu)點(diǎn)。具體過程為:首先進(jìn)行兩步液液萃取，第一步用氫溴酸水溶液(pH=6)萃取兩次洋金花粗提物的氯仿溶液，合并水相，第二步在弱堿環(huán)境下(pH=7.5)用四氯化碳萃取兩次第一步得到的水溶液，合并四氯化碳相，旋干，樣品中東莨菪堿的含量由粗提物中的3.02％升至28.9％;然后進(jìn)行大孔樹脂純化，采用D151大孔樹脂在上樣體積10BV，上樣濃度0.191mg/mL，上樣液pH為8，上樣流速為2BV/h

7、，溫度為25℃，洗脫液酸水的pH為1，洗脫液用量為16BV，洗脫流速為2BV/h的條件下進(jìn)行東莨菪堿純化，純化后樣品中的東莨菪堿含量為83.1％;最后在-20℃下進(jìn)行低溫結(jié)晶，得到的氫溴酸東莨菪堿的純度為99.12％，回收率為77.45％。此步驟通過控制制備過程中的pH和照度保持在對(duì)東莨菪堿旋光性影響較小的范圍內(nèi)并將最終產(chǎn)物成鹽進(jìn)行其旋光穩(wěn)定性的提高，使用前可通過堿處理將氫溴酸東莨菪堿還原為東莨菪堿游離態(tài)。對(duì)制得的氫溴酸東莨菪堿晶體進(jìn)行