Ⅰ脂肪組織缺氧及慢性低度炎癥-酒精致糖耐量異常的可能機制Ⅱ適量飲酒上調脂肪組織GLP-1R的表達從而改善高脂誘導的糖耐量異常.pdf

1、本文分為以下幾個部分展開論述：
　　第一部分：脂肪組織缺氧及慢性低度炎癥—酒精致糖耐量異常的可能機制
　　流行病學資料顯示:酒精攝入是導致慢性疾病及損傷的重要因素，而且很可能是可避免的因素，但是目前酒精的攝入量在日益增加且已經(jīng)成為世界性的問題。有文獻證明長期大量飲酒可導致糖耐量異常及胰島素抵抗，這正是2型糖尿病(T2DM)最主要的發(fā)病機制。盡管目前酒精導致T2DM的機制尚未完全明確，但是已有證據(jù)表明其與酒精所致的白色脂肪功能

2、失調有關。
　　傳統(tǒng)意義上，脂肪組織只是貯存能量的器官，但是隨著近年來相關脂肪因子的發(fā)現(xiàn)，白色脂肪組織已被認為是體內最大的內分泌器官。白色脂肪的功能失調可能在很多代謝性疾病的發(fā)生中起重要作用。肥胖情況下，白色脂肪中脂質堆積造成脂肪細胞體積增大，直徑可達200um，但是氧氣彌散的最大直徑在100um左右，因此可見，增大的脂肪細胞處于缺氧環(huán)境。缺氧誘導因子-1α（HIF-1α）及葡萄糖轉運蛋白1(GLUT1)在機體的缺氧反應中起重要作

3、用，被認為是氧代謝平衡的主要調節(jié)器。越來越多證據(jù)表明:脂肪組織的缺氧可導致其慢性低度炎癥的發(fā)生，從而使炎癥相關的脂肪因子如腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細胞介素6（IL-6）、瘦素、血管內皮生長因子(VEGF)等表達異常，而這被認為是胰島素抵抗及代謝綜合征的中心環(huán)節(jié)。
　　目的:
　　1)觀察長期大量飲酒對大鼠糖代謝的影響。
　　2)觀察長期大量飲酒對大鼠體重及內臟脂肪的影響。
　　3)從體內體外兩個層面觀察酒

4、精對脂肪組織缺氧相關因子表達的影響。
　　4)從體內體外兩個層面觀察酒精對炎癥相關因子的影響。
　　方法:
　　1)動物飼養(yǎng)
　　24只雄性Wistar大鼠（160-180g，4-6周），經(jīng)過一周的適應性飼養(yǎng)后，隨機分為對照組及酒精喂養(yǎng)組，酒精組給予5g/Kg/d灌胃。喂養(yǎng)8周后行口服葡萄糖耐量實驗。收集大鼠血清及脂肪組織。
　　2)細胞培養(yǎng)
　　OP9細胞種植于12孔板中，分為3組。A組為對照組，B

5、組為細胞開始分化時即加入酒精處理組，C組為細胞分化10天后加入酒精處理組。待C組于酒精中孵育48小時后，收集培養(yǎng)基及細胞。
　　3)葡萄糖氧化酶法測定血糖，放免法測定血清中胰島素含量，通過公式計算胰島素抵抗的穩(wěn)態(tài)評估模式.
　　4) Western blotting法檢測脂肪組織及OP9細胞中的HIF-1α、GLUT1、TNF-α、IL-6,脂肪組織中瘦素及VEGF的蛋白表達。
　　5)酶聯(lián)免疫吸附方法分別檢測血清及細

6、胞培養(yǎng)基中TNF-α、IL-6的水平。
　　結果:
　　1)長期大量酒精攝入導致大鼠糖耐量異常。
　　2)長期酒精攝入對大鼠體重無影響，但是可致內臟脂肪堆積。
　　3)長期酒精處理增加附睪脂肪組織及OP9細胞中缺氧因子HIF-1α和GLUT1表達。
　　4)長期酒精處理增加炎癥相關因子TNF-α、IL-6、瘦素及VEGF的表達和釋放。
　　結論:
　　長期大量酒精攝入致使內臟脂肪堆積，脂肪組織缺

7、氧，從而誘導慢性低度炎癥，大量炎性細胞因子釋放，這可能是酒精影響糖代謝新的分子機制。
　　第二部分：適量飲酒上調脂肪組織GLP-1R的表達從而改善高脂誘導的糖耐量異常
　　流行病學數(shù)據(jù)顯示:世界范圍內肥胖及2型糖尿病發(fā)病率日益上升。胰高血糖素樣肽1（GLP-1）類似物做為降糖藥物，其療效得到了一致的認可。在降糖的同時，GLP-1類似物還有著減低體重的作用。GLP-1及其類似物需與GLP-1受體(GLP-1R)受體結合后發(fā)揮作

8、用。
　　高脂飲食可導致肥胖繼而引起糖代謝異常，出現(xiàn)糖耐量受損及胰島素抵抗等一系列代謝綜合征表現(xiàn)。傳統(tǒng)意義上，內臟脂肪組織僅僅是貯存能量的器官，但是近年來研究發(fā)現(xiàn)，脂肪組織可分泌多種脂肪細胞因子，在糖脂代謝中起重要作用。脂肪組織可表達GLP-1R，少量研究顯示:肥胖人群中，脂肪組織中GLP-1R表達下降。但目前關于肥胖、糖代謝異常與脂肪組織中GLP-1R之間的研究尚不多。前期研究顯示:適量飲酒可通過影響脂肪組織中的信號通路改善高脂

9、誘導的胰島素抵抗。但尚無酒精對脂肪組織中GLP-1R表達的研究。
　　目的:
　　觀察適量飲酒對大鼠糖代謝的影響及其脂肪組織中GLP-1R的改變。
　　方法:
　　48只雄性wistar大鼠隨機分為對照組，酒精組(2.5g/Kg/d)，高脂組，高脂+酒精組(2.5g/Kg/d)。飼養(yǎng)7周后行腹腔內注射葡萄糖耐量實驗。處死大鼠后，稱量附睪周圍脂肪及腎周脂肪重量，計算脂肪體重比;western blotting法檢測

10、脂肪組織中GLP-1R的含量。
　　結果:
　　與對照組比較，高脂組大鼠體重顯著增加，附睪周圍脂肪及腎周脂肪沉積，出現(xiàn)糖耐量異常，其脂肪組織中GLP-1R表達減少;適量飲酒對正常飲食大鼠糖代謝、內臟脂肪含量及GLP-1R表達無顯著影響;適量飲酒減少高脂飲食誘導的內臟脂肪沉積，改善高脂飲食造成的糖耐量受損，其脂肪組織中GLP-1R表達較單純高脂飲食組上升。
　　結論:
　　適量飲酒可改善高脂飲食誘導的內臟脂肪沉積，