動(dòng)態(tài)超高壓微射流對(duì)甘薯葉黃酮提取、結(jié)構(gòu)以及抗氧化性的影響.pdf

1、甘薯(Ipomoea batatas LAM.)又名紅薯、番薯、地瓜、山芋、紅苕等,是我國(guó)四大糧食作物之一,其葉作為蔬菜具有豐富的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,享有“蔬菜皇后”的美譽(yù)。研究表明,甘薯葉中黃酮化合物含量高于一般蔬菜,具有抗氧化、抗腫瘤抑菌等生理功效,但是甘薯收獲后的甘薯葉并沒(méi)有引起人們的重視,而是作為農(nóng)業(yè)垃圾而丟棄。本論文以秋季甘薯收獲后的甘薯葉為原料,利用動(dòng)態(tài)超高壓微射流技術(shù)處理提取甘薯葉中黃酮類化合物,研究該處理技術(shù)對(duì)甘薯葉黃酮得率、結(jié)構(gòu)

2、和抗氧化性的影響。
　　 主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:
　　 1、以蘆丁為對(duì)照,采用硝酸鋁顯色法測(cè)定甘薯葉中黃酮含量。結(jié)果表明,經(jīng)顯色反應(yīng)后,蘆丁和甘薯葉黃酮最大吸收波長(zhǎng)基本一致,分別在505 nm和504nm,蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程線性良好,并且精密度較高,能夠用于甘薯葉黃酮含量的測(cè)定。
　　 2、比較了甘薯葉、葉柄、藤的黃酮含量,結(jié)果表明,甘薯葉中黃酮含量最高,并確定其為最佳試驗(yàn)原料進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。
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3、、通過(guò)正交試驗(yàn)優(yōu)化了動(dòng)態(tài)超高壓微射流處理提取甘薯葉黃酮的最佳提取工藝,結(jié)果表明,提取溫度是影響甘薯葉黃酮提取的最主要因素,確定最佳工藝參數(shù)為:乙醇體積分?jǐn)?shù)70％、料液比1:40(g／mL),微射流處理壓力為100 MPa、提取溫度75℃、提取時(shí)間120 min、微射流處理次數(shù)2次、樣品提取3次。最佳條件下得率為5.75％。
　　 4、分別采用掃描電鏡放大300倍和5000倍觀察甘薯葉樣品的微觀結(jié)構(gòu),結(jié)果表明:經(jīng)動(dòng)態(tài)超高壓微射流處

4、理的甘薯葉顆粒的粒度小于均質(zhì)機(jī)處理的甘薯葉顆粒的粒度；隨著微射流處理壓力的增加,甘薯葉顆粒的粒度降低,在120MPa時(shí)效果最佳,在140 MPa下甘薯葉顆粒會(huì)產(chǎn)生凝聚作用,凝結(jié)為較大的顆粒；微射流處理對(duì)細(xì)胞破碎程度隨著壓力的增加而增加。
　　 5、研究了LK001、AB-8、HPD-722、HPD-720等九種樹脂對(duì)甘薯葉黃酮的靜態(tài)吸附-解析試驗(yàn),并篩選出5種樹脂進(jìn)行靜態(tài)吸附動(dòng)力學(xué)試驗(yàn),確定性能最佳的樹脂為L(zhǎng)K001樹脂,最佳上

5、樣濃度在2～3 mg／mL之間,并通過(guò)動(dòng)態(tài)吸附解析試驗(yàn)確定最佳工藝參數(shù)為:上樣流速為2 mL／min,洗脫劑為70％(V／V)乙醇,洗脫流速為1.5 mL／min。
　　 6、利用HPLC-MS／MS對(duì)提取得到的甘薯葉黃酮進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析和槲皮素含量測(cè)定,研究動(dòng)態(tài)超高壓微射流處理對(duì)甘薯葉黃酮結(jié)構(gòu)和槲皮素含量的影響。結(jié)果表明,甘薯葉中含有槲皮素、楊梅黃酮、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、鼠李檸檬素、商陸黃素、紫云英苷、4’,7-二甲氧基山奈

6、酚7種黃酮類化合物,還含有綠原酸及其衍生物；微射流處理對(duì)甘薯葉黃酮結(jié)構(gòu)沒(méi)有顯著影響,微射流處理提取的甘薯葉黃酮,槲皮素含量降低,鼠李檸檬素含量增加；建立了槲皮素的HPLC-MS／MS的定量分析方法,測(cè)定甘薯葉常規(guī)提取樣品中槲皮素含量百分比為1.798％,甘薯葉經(jīng)微射流處理提取樣品中槲皮素含量百分比為1.425％。
　　 7、通過(guò)對(duì)常規(guī)提取、常規(guī)提取液100 MPa微射流處理、微射流100 MPa處理提取的甘薯葉黃酮樣品粗提液和純

7、化樣品進(jìn)行清除DPPH自由基、超氧陰離子自由基、羥基自由基試驗(yàn),研究微射流處理對(duì)甘薯葉黃酮抗氧化性的影響。結(jié)果表明,不同方法處理的提取液均具有清除3種自由基的效果,并且隨著甘薯葉黃酮濃度增加清除自由基能力增強(qiáng),但清除效果弱于Vc,對(duì)自由基的清除能力依次為清除DPPH自由基能力>清除O2-·能力>清除·OH能力。純化的樣品清除自由基效果優(yōu)于提取粗液；3種不同處理方法未純化樣品的清除自由基的能力沒(méi)有明顯區(qū)別,微射流100 MPa處理提取純化