孕酮介導(dǎo)的卵母細(xì)胞成熟信號通路在棉蚜生殖方式轉(zhuǎn)換中的作用研究.pdf

1、棉蚜(Aphis gossypii Glover)是重要的農(nóng)業(yè)害蟲，在我國北方它能隨季節(jié)的變化進(jìn)行周期性的孤雌生殖和有性生殖，即春夏以孤雌蚜進(jìn)行無性生殖而大量繁殖，秋天產(chǎn)生性母，進(jìn)而產(chǎn)生性雌，與雄蚜交配產(chǎn)卵，以卵過冬。雖然棉蚜的全生活史及生殖型轉(zhuǎn)換（或生殖可塑性）方式已經(jīng)明了，但其中的分子機(jī)制一直不清楚。目前研究蚜蟲生殖型轉(zhuǎn)換的一個模式是豌豆蚜(Acyrthosiphon pisum Harris)，與豌豆蚜不同，棉蚜有明顯的性母并且轉(zhuǎn)

2、換寄主植物。之前我們實(shí)驗(yàn)室利用RNA-seq測定了棉蚜孤雌、性母、性雌三種生殖型的差異基因表達(dá)譜，通過GO聚類和KEGG通路分析富集出了光傳導(dǎo)、孕酮介導(dǎo)的卵母細(xì)胞成熟、內(nèi)分泌調(diào)節(jié)、以及表皮構(gòu)成信號通路。
　　本論文選擇孕酮介導(dǎo)的卵母細(xì)胞成熟信號通路和光傳導(dǎo)信號通路進(jìn)行了初步研究。首先利用qRT-PCR對孕酮介導(dǎo)的卵母細(xì)胞成熟信號通路中的bub1、ccna2、polo、plk1和mad2基因進(jìn)行了表達(dá)驗(yàn)證，bub1、ccna2和po

3、lo在孤雌中的表達(dá)水平顯著高于性母。通過注射dsRNA對bub1、ccna2和polo進(jìn)行了初步的RNAi實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)bub1或ccna2 RNAi能夠影響孤雌蚜的卵巢發(fā)育，但是否影響生殖型轉(zhuǎn)換目前還不能確定。同時，也通過qRT-PCR測定了光傳導(dǎo)信號通路中的ninac、opsin、arr2、GNB2、Trp和ANA基因從孤雌向性母轉(zhuǎn)化過程中的時序表達(dá)模式，發(fā)現(xiàn)ninac、opsin、arr2和GNB2的表達(dá)水平在性母4齡若蟲期顯著上升。