載藥蒙脫石殼聚糖納米粒的制備及其角膜上皮細(xì)胞毒性與滲透性的研究.pdf

1、滴眼液是治療眼部疾病的首選，但由于眼部特殊的生理屏障，通常藥物在眼部的生物利用度很低。因此研究一種可以改善藥物生物利用度的新型眼部給藥系統(tǒng)是非常必要的。至今結(jié)果表明納米技術(shù)將會給眼用藥物帶來很大的益處。本課題以殼聚糖與蒙脫石為載體，結(jié)合它們各自的特點，采用納米技術(shù)制備載藥蒙脫石殼聚糖納米粒。對其體外釋放性能、粒徑、電位、形態(tài)、結(jié)構(gòu)、離體兔眼角膜透過性、兔眼刺激性、細(xì)胞毒性、細(xì)胞滲透性進(jìn)行了比較深入的研究。此納米粒有望成為治療眼部疾病的一

2、種新型給藥系統(tǒng)。
　　以多聚磷酸鈉為交聯(lián)劑，采用離子凝膠法制備載藥蒙脫石殼聚糖納米粒。鹽酸倍他洛爾為藥物模型。此研究中，采用四因數(shù)三水平來設(shè)計正交實驗，各因素分別為殼聚糖濃度、TPP濃度、殼聚糖/TPP質(zhì)量比、藥物濃度，以包封率和載藥量為指標(biāo)來優(yōu)化處方。使用激光粒度儀分析納米粒的粒徑與電位，結(jié)果發(fā)現(xiàn)粒徑范圍在338.4nm~585.5nm之間，電位在24.62~36.42mV之間。最優(yōu)處方的包封率、載藥量、粒徑、電位分別為36.1

3、3±0.16％、14.50±0.06%、460nm、29.18mV。納米粒的形態(tài)采用透射電鏡觀察。結(jié)果顯示納米粒為球形，表面略顯粗糙。采用透析法研究其體外釋放，發(fā)現(xiàn)最優(yōu)處方藥物的初始釋放約60%并緩釋10個小時，相比具有嚴(yán)重突釋的鹽酸倍他洛爾水溶液表現(xiàn)出緩釋性能。納米粒的釋放曲線符合Ritger-Pappa釋放動力學(xué)模型。采用熱重分析（TGA）、傅里葉轉(zhuǎn)換紅外光譜法（FT-IR）和X-射線衍射法（XRD）對納米粒進(jìn)行表征。熱重分析發(fā)現(xiàn)納

4、米粒中藥物的降解溫度升高到450℃，納米粒紅外圖譜中出現(xiàn)兩個新的特征峰以及其X-衍射圖譜中失去蒙脫石與殼聚糖的特征峰，表明載藥蒙脫石成功的鑲嵌于殼聚糖成納米粒中。粘膜粘附實驗發(fā)現(xiàn)殼聚糖正電位從29.18mV降到25.88mV，說明殼聚糖與粘膜發(fā)生靜電作用。
　　研究納米粒的角膜透過及兔眼刺激性，角膜透過性實驗表明優(yōu)化處方的表觀滲透系數(shù)在藥物水溶液和商品藥貝特舒的表觀滲透系數(shù)之間。兔眼刺激性實驗也表明優(yōu)化處方?jīng)]有明顯刺激。
　

5、　以人永生化角膜上皮細(xì)胞為細(xì)胞模型，研究納米粒的細(xì)胞毒性及體外角膜上皮細(xì)胞透過性。細(xì)胞毒實驗結(jié)果表明在低劑量下最優(yōu)處方納米粒的細(xì)胞毒性明顯小于于藥物水溶液和貝特舒。其中，藥物水溶液的細(xì)胞毒性呈現(xiàn)濃度和時間依賴性。實驗結(jié)果還表明最優(yōu)處方納米粒在低劑量時幾乎沒有細(xì)胞毒性，然而其劑量超過50μL時細(xì)胞存活率下降較明顯。體外細(xì)胞角膜滲透性實驗結(jié)果表明優(yōu)化處方的表觀滲透系數(shù)在藥物水溶液和商品藥貝特舒的表觀滲透系數(shù)之間。但其細(xì)胞滲透量大于體外兔眼離