FK506協(xié)同NGF促進(jìn)缺氧后PC12細(xì)胞突起生長(zhǎng)的研究及相關(guān)機(jī)制的探討.pdf

1、周?chē)窠?jīng)損傷在骨科是一種常見(jiàn)的致殘性疾病。周?chē)窠?jīng)損傷后往往伴有神經(jīng)的缺血缺氧性損傷，特別是擠壓傷后。神經(jīng)再生的過(guò)程實(shí)際上是受損神經(jīng)元形成新的軸突或軸突的生長(zhǎng)延長(zhǎng)，再與靶器官重建突觸連接并恢復(fù)其正常功能的過(guò)程。加快周?chē)窠?jīng)損傷后軸突的再生，對(duì)提高臨床周?chē)窠?jīng)損傷修復(fù)后療效具有重要意義。免疫抑制藥物他克莫司（FK506）已被發(fā)現(xiàn)在異體手移植的病人上體現(xiàn)出促神經(jīng)生長(zhǎng)的“副”作用，并已表明在實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭芯哂猩窠?jīng)保護(hù)和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)作用，在體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中

2、能增加神經(jīng)突起的延長(zhǎng)和促進(jìn)神經(jīng)再生速率。NGF已經(jīng)被公認(rèn)在神經(jīng)損傷后神經(jīng)再生方面具有神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)和神經(jīng)保護(hù)作用。
　　本文通過(guò)構(gòu)建神經(jīng)細(xì)胞缺氧模型，研究了他克莫司（FK506）對(duì)神經(jīng)元突起生長(zhǎng)的影響，探索了FK506協(xié)同神經(jīng)生長(zhǎng)因子（NGF）對(duì)神經(jīng)元突起生長(zhǎng)的促進(jìn)作用，經(jīng)過(guò)一系列的對(duì)比實(shí)驗(yàn)，篩選出最佳藥物配比濃度。進(jìn)一步定量檢測(cè)不同濃度FK506在常氧與缺氧狀態(tài)下，分別對(duì)PC12（類神經(jīng)細(xì)胞研究模型）細(xì)胞突起生長(zhǎng)的影響。并通過(guò)蛋白免疫

3、印跡法（Western blotting）檢測(cè)FK506在常氧與缺氧時(shí)對(duì)PC12細(xì)胞HSP70（熱休克蛋白70）、HIF-1ɑ（缺氧誘導(dǎo)因子）表達(dá)的影響，探討FK506保護(hù)缺氧性神經(jīng)元受損的可能性機(jī)制。
　　結(jié)果表明：在缺氧及常氧狀態(tài)下，F(xiàn)K506在1-1000 nmol/L均可協(xié)同NGF 促進(jìn)PC12細(xì)胞突起的生長(zhǎng)，其中FK506100 nmol/L與NGF10ng/ml對(duì)缺氧后PC12細(xì)胞突起生長(zhǎng)的協(xié)同作用更明顯。1