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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:通過(guò)檢測(cè)不同條件下足細(xì)胞的活力、凋亡,NF-κB的活性,caspase8、3的活性和Fas的表達(dá),探討阿霉素誘導(dǎo)足細(xì)胞凋亡及他克莫司(FK506)足細(xì)胞保護(hù)作用機(jī)制。
材料與方法:體外培養(yǎng)永生化的小鼠足細(xì)胞,應(yīng)用MTT、流式細(xì)胞術(shù)、ELISA、westernblot檢測(cè)、分光光度計(jì)法、對(duì)照組、阿霉素組、FK506+阿霉素組和FK506組,足細(xì)胞的活力凋亡、核轉(zhuǎn)錄因子(NF-κB)的活性、Fas的表達(dá)、caspase8、3
2、的活性。
結(jié)果:MTT顯示正常足細(xì)胞(對(duì)照組)的活力顯著高于阿霉素刺激組(模型組)和干預(yù)組(ADR+FK506)(P<0.05),與FK506組相比無(wú)差異(P>0.05);流式細(xì)胞檢測(cè)(FCAS)模型組的足細(xì)胞凋亡率顯著高于對(duì)照組、干預(yù)組(P<0.05),與FK506組相比無(wú)差異(P>0.05);ELISA法檢測(cè)模型組NF-κB的活性顯著高于對(duì)照組、干預(yù)組(P<0.05),與FK506組相比無(wú)差異(P<0.05);wester
3、nblot檢測(cè)Fas的表達(dá)模型組顯著高于對(duì)照組、干預(yù)組(P<0.05),與FK506組相比無(wú)差異(P>0.05);分光光度法檢測(cè)模型組caspase8、3的活性顯著高于對(duì)照組、干預(yù)組(P<0.05),與FK506組相比無(wú)差異(P>0.05)。
結(jié)論:阿霉素激活NF-κB誘導(dǎo)Fas的表達(dá),Caspase8、3活性升高,導(dǎo)致足細(xì)胞的凋亡。FK506能抑制ADR誘導(dǎo)的NF-κB活性,減少Fas的表達(dá),從而下游Caspase8、3的活
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