穿透支原體LAMPs通過激活NF-κB誘導(dǎo)小鼠巨噬細(xì)胞表達(dá)iNOS和凋亡.pdf

1、目的研究從穿透支原體(Mpe)提取的脂質(zhì)相關(guān)膜蛋白(LAMPs)在體外誘導(dǎo)小鼠巨噬細(xì)胞表達(dá)誘導(dǎo)性一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA和蛋白及產(chǎn)生一氧化氮(NO)的水平,研究該膜蛋白能否激活經(jīng)其處理的小鼠巨噬細(xì)胞中的核因子kappa B(NF-κB)及誘導(dǎo)小鼠巨噬細(xì)胞發(fā)生凋亡的情況,以便了解Mpe潛在的致病性,并為進(jìn)一步探索Mpe LAMPs誘導(dǎo)小鼠巨噬細(xì)胞表達(dá)iNOS及誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞發(fā)生凋亡的分子機(jī)制提供試驗(yàn)依據(jù).方法用從Mpe提取的LAM

2、Ps刺激小鼠巨噬細(xì)胞,用Griess試劑測(cè)定經(jīng)刺激后的小鼠巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的NO水平,以RT-PCR、免疫細(xì)胞化學(xué)和Western blot等方法分析iNOS mRNA和蛋白的表達(dá).用間接免疫熒光和Western blot檢測(cè)經(jīng)MpeLAMPs處理的小鼠巨噬細(xì)胞中NF-κB的激活和NF-κB的特異性抑制劑二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)對(duì)iNOS mRNA和蛋白的表達(dá)及產(chǎn)生NO的影響.用細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒檢測(cè)經(jīng)Mpe LAMPs處理的小鼠巨