安息香總香脂酸的提取純化工藝及其腦保護作用研究.pdf

1、目的:研究安息香中主要成分總香脂酸的提取純化工藝及其腦保護作用。
　　方法：①總香脂酸評價方法的建立以重量法（藥典法）為參照，建立紫外分光光度法(UV)測定安息香總香脂酸含量；以高效液相色譜法（HPLC）測定總香脂酸中苯甲酸含量。
　?、诳傁阒崽崛」に囈钥傁阒岷捅郊姿徂D移率為指標，在預試基礎上,采用溶劑提取法，對不同提取溶劑、不同提取方法進行考察后進一步對提取溶劑濃度、用量、提取時間三個主要影響因素進行正交設計實驗，以確

2、定安息香總香脂酸最佳提取工藝的各項參數(shù)。
　　③總香脂酸純化工藝以總香脂酸、苯甲酸吸附量和洗脫率為指標，對樹脂種類、上樣液pH、濃度、上樣量、上樣流速、解吸附劑用量、洗脫劑體積分數(shù)及用量進行考察，以確定總香脂酸最佳純化工藝參數(shù)。
　　④總香脂酸腦保護作用研究選用小鼠急性腦缺血模型、小鼠常壓耐缺氧模型進行實驗，考察總香脂酸對小鼠存活時間的影響。
　　結果：①總香脂酸評價方法的建立 UV法檢測波長為223nm，回歸方程為A

3、=66.750C+0.0377(r=0.9991)； HPLC法回歸方程為 Y=5839.9X－259.06（r=0.9994）。UV法與重量法相比較，P=0.437（＞0.05），即認為兩種方法測定結果無顯著性差異，提示UV法可用于測定安息香總香脂酸含量。
　　②總香脂酸提取工藝最佳提取工藝參數(shù)為：氫氧化鈉濃度為0.75mol/l、溶媒用量為15倍、提取時間為1h，提取1次。
　?、劭傁阒峒兓に囎罴鸭兓に噮?shù)為：上樣

4、液pH為12、上樣液濃度為0.02g/ml、上樣量8BV、上樣流速為2BV/h、3BV去離子水除雜、2BV的稀鹽酸解吸附、6BV的95％乙醇洗脫。純化后，總香脂酸平均純度達73.49%，純化倍數(shù)達2.78；苯甲酸平均純度達63.97%，純化倍數(shù)達2.95。
　?、芸傁阒崮X保護作用研究與溶媒對照組比較，總香脂酸組、安息香組、冰片組對抗小鼠急性腦缺血、缺氧作用均不明顯，但一定程度上延長了小鼠存活時間；而總香脂酸-冰片配伍組、安息香-

5、冰片配伍組對抗小鼠急性腦缺血、缺氧作用明顯，能夠顯著延長小鼠存活時間；總香脂酸組與安息香組比較、總香脂酸-冰片配伍組與安息香-冰片配伍組比較，P值均大于0.05，表明總香脂酸與安息香生藥在藥效學上無顯著性差異，但總香脂酸對小鼠存活時間有延長趨勢，與課題組前期研究結果一致；上述結果表明總香脂酸為安息香有效成分，且進一步驗證了冰片的“引藥入腦、佐使有功”的作用。
　　結論：①UV法與重量法對總香脂酸含量測定的結果無顯著性差異，但重量法

6、步驟繁瑣、周期長而UV法操作步驟減少、周期縮短，測定結果準確可靠，可用于安息香總香脂酸的含量測定。
　?、谔崛」に嚳茖W合理，穩(wěn)定可靠，提取效率高；717型陰離子交換樹脂對安息香總香脂酸的純化效果好，周期短，成本低，為后期開展總香脂酸腦保護作用的研究奠定了基礎。
　?、劭傁阒彷^安息香生藥而言，藥效學上雖然無顯著性差異，但在一定程度上也延長了小鼠存活時間，提示總香脂酸可能為安息香有效成分，且進一步驗證了冰片“引藥入腦、佐使有功