低溫去白細(xì)胞氧合血Plegisol液對(duì)豬供體心肌保護(hù)作用的研究.pdf

1、背景：心臟移植是目前治療各類終末期心臟病和不可矯治先天性心臟病的唯一有效手段。隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展及新型免疫抑制藥物的臨床應(yīng)用,心臟移植技術(shù)已經(jīng)逐漸成熟并在心臟外科手術(shù)治療中占據(jù)非常重要的地位,接受心臟移植術(shù)后的患者存活時(shí)間明顯延長,生活質(zhì)量得以提高。但在心臟移植領(lǐng)域中依然存在著如供心來源缺乏、供心保存、心肌缺血再灌注損傷、移植后冠狀動(dòng)脈血管病等還沒根本解決的問題。其中供心缺乏和心臟保存技術(shù)是限制心臟移植發(fā)展的重要因素。供體器官嚴(yán)重缺

2、乏是目前臨床器官移植面臨的最大問題之一。傳統(tǒng)的心臟移植標(biāo)準(zhǔn)是由Copeland等人制定的,即最佳供體心臟應(yīng)來源于腦死亡心不停跳供體(heart beating donor HBD)。但是目前需要接受心臟移植的患者逐漸增多,而符合“傳統(tǒng)供體標(biāo)準(zhǔn)”的供體供不應(yīng)求,導(dǎo)致有指征接受心臟移植的患者因得不到供心而在等待中死亡。因此可以適當(dāng)放寬某些供體標(biāo)準(zhǔn),即通過接受“邊緣性供體(margin donor)”,來緩解供體器官匱乏的局面。這些供體器官功

3、能可能部分受損,但這些損害在通過移植后,在受體康復(fù)期間會(huì)逐漸恢復(fù)。常見的邊緣性供體器官包括無心跳供體器官(non-heart-beating donor NHBD)、獲取前需大劑量藥物維護(hù)的供體器官、長冷缺血時(shí)間供體器官、老年供者器官(＞40歲)等。其中心停跳供體(non-heart-beating donor NHBD)就具有很好的應(yīng)用前景。長時(shí)間缺血是邊緣性供心能否被利用所面臨的最重要問題之一,因此如何延長供心安全保存時(shí)間并提高移植

4、心臟的存活率是對(duì)心臟保存技術(shù)很大的挑戰(zhàn)。心臟保存技術(shù)主要包括以下兩條基本方面:通過降溫使心臟停搏,即通過低溫有效減低心肌新陳代謝來減少心肌能量消耗。實(shí)踐證明將供心保存在4℃環(huán)境,可使其代謝率降低為J下常溫度的1/10,此時(shí)心肌的能量消耗最低,但它延緩了心臟功能恢復(fù)的時(shí)間,誘發(fā)內(nèi)皮細(xì)胞損傷,增加了晚期移植物血管病變的發(fā)生率；人工供給必要的生命基質(zhì),用以維持組織細(xì)胞的最低能量消耗。目前臨床常用的心肌保護(hù)液有UW液、Euro-Collins液

5、、Celsior液、St.Thomas液、Stanford液、HTK液等,它們均可使心臟處于停博狀態(tài)并給心臟提供更多的能量底物,可減輕保存期間及缺血再灌注對(duì)心肌的損傷,但仍沒有徹底解決保存后心臟功能和心肌結(jié)構(gòu)受損的問題,不能用于長期的心臟保存,因此改進(jìn)及完善心肌保護(hù)液成為臨床上的迫切要求。在心肌保護(hù)液不斷發(fā)展的同時(shí),各種心臟保存技術(shù)如各種含氧、不含氧的灌注技術(shù),間斷灌注和持續(xù)灌注、液相灌注和氣相灌注技術(shù)的聯(lián)合應(yīng)用,已經(jīng)使供心的保存突破4

6、-6小時(shí)的時(shí)限。近年來采用去白細(xì)胞氧合血心肌保護(hù)液對(duì)心肌進(jìn)行保護(hù)成為國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。從理論上講,它能給供心提供接近生理的內(nèi)環(huán)境,維持心肌細(xì)胞的有氧代謝,有效減輕心肌的缺血再灌注損傷,但其在心臟移植過程中對(duì)供心的具體保護(hù)作用和機(jī)制尚不明確。本實(shí)驗(yàn)即通過建立豬失血性休克腦死亡模型,在心臟熱缺血10分鐘后摘取豬供心,分別置于去白細(xì)胞氧合血Plegisol液4℃恒溫連續(xù)微流量灌注、4℃Plegisol液條件下恒溫保存4小時(shí),并進(jìn)行同種異體心臟

7、移植,通過檢測(cè)其在不同時(shí)間段的心臟復(fù)跳、心臟血流動(dòng)力學(xué)、心肌蛋白含量等指標(biāo),探討低溫去白細(xì)胞氧合血Plegisol心肌保護(hù)液持續(xù)微流量灌注對(duì)熱缺血豬供心肌的保護(hù)效果及作用機(jī)制。
　　 方法：⑴將來自同一品系的28只瑞典家豬隨機(jī)分為兩組,實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,每組14只,各組內(nèi)隨即選7只作為供體,7只作為受體。所有豬肌肉注射麻醉藥誘導(dǎo)麻醉后,然后耳緣靜脈給予泮庫溴氨、鹽酸氯胺酮聯(lián)合靜脈麻醉。氣管切開術(shù)后氣管插管,呼吸機(jī)輔助呼吸。頸內(nèi)靜脈

8、、頸內(nèi)動(dòng)脈穿刺連接心電監(jiān)護(hù)儀監(jiān)測(cè)中心靜脈壓及動(dòng)脈壓,待各項(xiàng)指標(biāo)穩(wěn)定時(shí)進(jìn)行手術(shù)暴露心臟。通過頸內(nèi)動(dòng)脈穿刺采集脫白細(xì)胞及血小板的血液,在心臟熱缺血10分鐘后摘取供心。⑵將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組供心分別置于含血Plegisol液4℃恒溫連續(xù)微流量灌注4小時(shí)、4℃Plegisol液恒溫保存4小時(shí)后,采用Shumway原位心臟移植的經(jīng)典術(shù)式將供心移植給受體。實(shí)驗(yàn)組用含血Plegisol液4℃低溫微流量持續(xù)灌注,對(duì)照組則行心臟移植手術(shù)期間保持胸腔內(nèi)低溫狀態(tài)

9、(4℃)。⑶心臟移植手術(shù)心臟復(fù)跳后記錄7日內(nèi)的血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)如心率(HR)、平均動(dòng)脈壓(MAP),并用超聲探頭記錄心輸出量(CO),冠狀動(dòng)脈平均血流量(CF);采集術(shù)后0時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)、1日、3日、7日靜脈血測(cè)定心肌肌鈣蛋白T(cTnT)、肌紅蛋白(Mb)的水平。7日后處死實(shí)驗(yàn)用豬摘取供心測(cè)定心肌含水量(MWC)。⑷所有數(shù)據(jù)均采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS17.0進(jìn)行處理,全部數(shù)據(jù)均以(x)±S表示,兩組定量資料間比較采用t檢驗(yàn),不滿足t檢

10、驗(yàn)的采用t檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)a取0.05,P小于0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：①心臟復(fù)跳情況:心臟移植后實(shí)驗(yàn)組的3只家豬出現(xiàn)室顫,給予電除顫后恢復(fù)竇性心律,其余4只家豬自動(dòng)恢復(fù)竇性心律;對(duì)照組5只家豬出現(xiàn)室顫,4只給予電除顫后恢復(fù)竇性心律,1只因持續(xù)室顫電除顫失敗后死亡,其余2只自動(dòng)恢復(fù)竇性心律。②7日內(nèi)平均心率、平均動(dòng)脈壓(MAP)、心輸出量(CO)、冠狀動(dòng)脈的血流量(CF)及實(shí)驗(yàn)結(jié)束后心肌的含水量(MWC)結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組

11、平均心率:105.34±9.8次/分,平均動(dòng)脈壓:76.36±7.27mmhg,心輸出量:2.62±0.04L/min,冠狀動(dòng)脈的血流量:88.59±6.32 L/min,心肌的含水量:78.55±0.48％:對(duì)照組平均心率:109±10.0次/分,平均動(dòng)脈壓:53.08±7.13mmhg,心輸出量:1.80±0.10L/min,冠狀動(dòng)脈的血流量:76.18±5.14 L/min,心肌的含水量:79.77±0.53%。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的平

12、均心率及心肌的含水量沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),實(shí)驗(yàn)組的平均動(dòng)脈壓、心輸出量、冠狀動(dòng)脈的血流量與對(duì)照組相比顯著較高,且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。③心肌蛋白:對(duì)照組cTnT、Mb水平明顯高于實(shí)驗(yàn)組,兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),提示對(duì)照組心肌破壞程度顯著高于實(shí)驗(yàn)組。
　　 結(jié)論：與傳統(tǒng)單純低溫靜置保存法相比,低溫去白細(xì)胞氧合血Plegisol心肌保護(hù)液持續(xù)微流量灌注應(yīng)用于心臟移植中能顯著減少熱缺血供心對(duì)血流動(dòng)力學(xué)的