七氟烷預(yù)處理對(duì)體外循環(huán)大鼠腦TLR9-NF-κB信號(hào)通路的影響.pdf

1、目的:
　　評(píng)價(jià)七氟烷預(yù)處理對(duì)體外循環(huán)腦損傷大鼠腦組織中TLR9、NF-κB的表達(dá)，探討TLR9/NF-κB信號(hào)通路在七氟烷預(yù)處理對(duì)體外循環(huán)大鼠腦損傷中的作用。
　　方法:
　　選擇清潔級(jí)雄性SD大鼠40只，350～450g，采用無(wú)血預(yù)充法制備大鼠不停跳體外循環(huán)模型，并隨機(jī)分為假手術(shù)組（S組）、體外循環(huán)(CPB)組（C組）、SEV（七氟烷）預(yù)處理+CPB組（E組）和SEV預(yù)處理+TLR9信號(hào)通路抑制劑CpG ODN20

2、88+CPB組（F組），每組10只。預(yù)處理方法為吸入2.4％七氟烷1h，純氧洗脫30min后建立CPB模型1h。分別于轉(zhuǎn)流即刻(T0)、轉(zhuǎn)流30min(T1)、停轉(zhuǎn)流即刻(T2)、轉(zhuǎn)流后1h(T3)、轉(zhuǎn)流后2h(T4)、轉(zhuǎn)流后3h(T5)采集血清標(biāo)本，ELISA法檢測(cè)血清中S100-β的濃度。3h后取腦組織并用TUNEL法檢測(cè)海馬中神經(jīng)細(xì)胞的凋亡率，采用Westem blot法檢測(cè)海馬組織TLR9蛋白表達(dá)及NF-κB(p65)的表達(dá)。<

3、br>　　結(jié)果:
　　1.大鼠各時(shí)間點(diǎn)心率、平均動(dòng)脈壓、肛溫及血?dú)夥治鼋Y(jié)果
　　心率、平均動(dòng)脈壓在轉(zhuǎn)流開(kāi)始后顯著降低（與T0比較，p＜0.05），至轉(zhuǎn)流結(jié)束后1h開(kāi)始恢復(fù)（與T0比較，p＞0.05）;肛溫在轉(zhuǎn)流期間保持32℃～34℃;酸堿平衡保持穩(wěn)定;二氧化碳分壓與氧分壓在整個(gè)過(guò)程中較為穩(wěn)定（P＞0.05）;紅細(xì)胞壓積在開(kāi)始轉(zhuǎn)流后下降(P＜0.05);在轉(zhuǎn)流過(guò)程中鉀離子濃度始宗保持穩(wěn)定（P＞0.05）。
　　2.TUN

4、EL檢測(cè)海馬神經(jīng)元凋亡
　　與S組平均分光密度值比較，C組和E、F組的平均分光密度值增高(p＜0.05);與C組相比，E、F組平均分光密度值降低(p＜0.05);與E組比較，F(xiàn)組平均分光密度值減低(p＜0.05)。
　　3.大鼠血清S100-β(ELISA)檢測(cè)
　　與S組比較，C組和E、F組T1～5血清S100-β濃度均增高（P＜0.05）;與C組比較，E、F組T1～5血清S100-β濃度均減低(P＜0.05);與E

5、組比較，F(xiàn)組T1～5血清S100-β濃度均減低（P＜0.05）。
　　4.Western-blot檢測(cè)大鼠海馬組織NF-κB(p65)蛋白
　　與S組比較，C組與E、F組海馬組織NF-κB(p65)蛋白表達(dá)均顯著增高(P＜0.05);與C組比較，E、F海馬組織NF-κB(p65)蛋白表達(dá)顯著減低(P＜0.05);與E組比較，F(xiàn)組海馬組織NF-κB(p65)蛋白表達(dá)增高（P＜0.05）。
　　5.Western-blot

6、檢測(cè)大鼠海馬組織TLR9蛋白
　　與S組比較，C組與E、F組海馬組織TLR9蛋白表達(dá)均顯著增高(P＜0.05);與C組比較，E、F組海馬組織TLR9蛋白表達(dá)顯著減低（P＜0.05）;與E組比較，F(xiàn)組海馬組織TLR9蛋白表達(dá)增高（P＜0.05）。
　　結(jié)論:
　　1.TLR9/NF-κB信號(hào)通路參與體外循環(huán)腦損傷的調(diào)控。
　　2.七氟烷預(yù)處理可能通過(guò)預(yù)先激活NF-κB的表達(dá)進(jìn)而抑制TLR9/NF-κB信號(hào)通路的激活