七氟烷預處理聯(lián)合后處理對大鼠肺缺血再灌注損傷核轉(zhuǎn)錄因子κB表達的影響.pdf

1、目的：探討七氟烷預處理聯(lián)合后處理對大鼠肺缺血再灌注損傷核轉(zhuǎn)錄因子κB表達的影響，從而為七氟烷聯(lián)合作用的器官保護作用奠定理論基礎(chǔ)。
　　方法：選擇新疆醫(yī)科大學動物實驗中心提供的健康、清潔級、雄性SD大鼠54只，體重在300～350 g之間，按照多個樣本均數(shù)比較的樣本含量計算公式估算出本研究所需大鼠共54只，每組18只。按照隨機數(shù)字表法隨機分為3組（n=18）：假手術(shù)組(S組)：大鼠進行腹腔注射麻醉后仰臥位固定，游離右側(cè)頸總靜脈，行深

2、靜脈置管，并持續(xù)泵入0.9％氯化鈉注射液，同時游離大鼠氣管，行氣管切開并進行氣管插管，接小動物呼吸機行機械通氣，通氣頻率65-70次/min，潮氣量10~15ml/kg，呼吸比1.0∶1.5。呼吸機的進氣口與裝有七氟烷揮發(fā)罐的麻醉機呼吸回路末端相連。通氣30 min后，大鼠行右側(cè)臥位，并在大鼠左側(cè)第5肋間進胸，應用鈍性分離離斷左下肺韌帶，游離左肺門，并應用在0.9％氯化鈉注射液中浸泡過的濕紗布覆蓋所暴露的肺組織制備S組模型；肺缺血再灌注

3、組(I/R組)：采用同S組模型同樣模型制備方法對大鼠肺組織進行暴露，同時于頸總靜脈注射肝素鈉50 U進行大鼠血液肝素化。注射肝素鈉5 min后，于大鼠呼氣末采用無創(chuàng)血管對所游離出的大鼠左肺門進行夾閉，夾閉后進行觀察，通氣時肺組織不再膨脹，顏色由淡紅色變?yōu)榘底霞t色，表明肺門阻斷成功。在大鼠肺門阻斷45 min后，松開血管鉗恢復大鼠肺組織的血液循環(huán)和通氣，形成肺組織的再灌注，并進行觀察。5min內(nèi)大鼠肺組織與通氣時膨脹，且肺組織顏色逐漸恢復

4、成再灌注之前的顏色，表明大鼠肺組織的再灌注成功，大鼠肺組織再灌注的模型制備成功；七氟烷預處理聯(lián)合后處理組(SP組)：在對大鼠左肺門進行阻斷前前吸入2.1％七氟烷30 min，洗脫10 min，然后阻斷左肺門45 min，并于形成再灌注的即刻再次吸入七氟烷30min，以此制備七氟烷聯(lián)合處理組的模型。并分別于再灌注30、60和120 min時隨機處死6只大鼠，取大鼠肺組織，測定大鼠肺組織濕重/干重比值(W/D比值)，采用ELISA法測定大鼠

5、肺組織TNF-α含量，采用RT-PCR法測定大鼠肺組織NF--κB p65 mRNA的表達并采用Western blot法測定核蛋白NF-κB活性的表達，同時光鏡下觀察肺組織病理學結(jié)果，對大鼠肺組織損傷情況進行評價。
　　結(jié)果：與S組比較，I/R組和SP組再灌注各時點肺組織W/D比值、TNF-α含量、NF--κB p65 mRNA及NF-κB活性均升高(P<0.05)；與I/R組比較，SP組再灌注各時點肺組織W/D比值、TNF-α