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1、目的:評(píng)價(jià)七氟烷預(yù)處理聯(lián)合后處理對(duì)大鼠肺缺血再灌注損傷時(shí)肺組織血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE) mRNA的影響,探討七氟烷預(yù)處理聯(lián)合后處理對(duì)肺缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。
方法:選擇新疆醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供的健康、清潔級(jí)、SD大鼠,體重在250~350g之間,計(jì)算出本研究所需大鼠共54只,每組18只。將大鼠按照隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為3組(n=18)。假手術(shù)組(S組):大鼠進(jìn)行腹腔注射麻醉后仰臥位固定,游離大鼠氣管,行氣管插管術(shù),接小
2、動(dòng)物呼吸機(jī)行機(jī)械通氣30 min后,大鼠行右側(cè)臥位,并在大鼠左側(cè)第5肋間進(jìn)胸,游離左肺門,并應(yīng)用在0.9%氯化鈉注射液中浸泡過(guò)的濕紗布覆蓋所暴露的肺組織制備S組模型;肺缺血再灌注組(I/R組):采用同S組模型同樣模型制備方法對(duì)大鼠肺組織進(jìn)行暴露,于大鼠呼氣末采用無(wú)創(chuàng)血管對(duì)所游離出的大鼠左肺門(包括左主支氣管、左肺動(dòng)、靜脈)進(jìn)行夾閉。在大鼠肺門阻斷45 min后,松開(kāi)血管鉗恢復(fù)大鼠肺組織的血液循環(huán)和通氣,形成肺組織的缺血再灌注模型;七氟烷
3、預(yù)處理聯(lián)合后處理組(SPr+o組):在對(duì)大鼠左肺門進(jìn)行阻斷前前吸入2.1%七氟烷30 min,洗脫10 min,然后阻斷左肺門45 min,并于形成再灌注的即刻再次吸入2.1%七氟烷30min,以此制備七氟烷聯(lián)合處理組的模型。并分別于再灌注30、60和120 min時(shí)隨機(jī)處死6只大鼠,取大鼠肺組織,測(cè)定大鼠肺組織濕重/干重比值(W/D比值),蘇木精-伊紅染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)行組織學(xué)檢查,比
4、色法測(cè)定丙二醛(malondialdehyde,MDA)表達(dá)水平,酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,Elisa)測(cè)定血漿內(nèi)皮素-1(endothelin-1,ET-1)表達(dá)水平,RT-PCR法測(cè)定ACEmRNA的表達(dá)。
結(jié)果:與S組相比,Spr+o組和I/R組再灌注各時(shí)點(diǎn)肺組織W/D、ACEmRNA及血漿ET-1、MDA表達(dá)水平均升高(P<0.05)。與I/R組相比,Spr+o
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