凍干泥鰍粉對負荷訓練并力竭小鼠肝細胞凋亡的影響與機制研究.pdf

1、研究目的:
　　應用生物化學、免疫組化和細胞形態(tài)學技術(shù)檢測肝組織的結(jié)構(gòu)、功能、肝細胞凋亡及部分凋亡因子表達情況，對凍干泥鰍粉飲品提高運動能力與保護運動機體肝的關(guān)系進行探討，揭示其抗疲勞效果及機制，為運動實踐中的應用提供實驗依據(jù)和奠定科學理論。
　　研究方法:
　　篩選雄性ICR小鼠40只，按體重分層隨機分為安靜對照組(C)、單純訓練組(T)、凍干泥鰍粉干預組(N)，T組和N組小鼠放入水深80 cm、直徑55 cm桶內(nèi)游

2、泳，水溫控制在29±3℃。每周五天，共訓練三周。第一周不負重，游泳30分鐘，第二周尾根部負重2％，游泳40分鐘，第三周負重3％，游泳50分鐘。從第二周開始C組和T組灌生理鹽水，N組灌自制凍干泥鰍粉飲品。訓練結(jié)束后休息2天，T組和N組尾根部負重5％進行力竭運動。力竭運動24h后各組均采血取材。
　　(1)檢測血清中ALT和AST活性。
　　(2)檢測肝SOD活性和MDA含量。
　　(3)HE染色觀察肝組織細胞結(jié)構(gòu)和形態(tài)的

3、變化。
　　(4)采用TUNEL法觀察肝細胞的凋亡情況。
　　(5)免疫組化法觀察抗凋亡因子bcl-2及促凋亡因子bax蛋白分布狀況。
　　(6)Western Blot檢測肝組織中bcl-2和bax蛋白含量。
　　研究結(jié)果:
　　(1)游泳至力竭時間:N組為123.52±51.65 min，T組為55.86±20.23 min，N組非常顯著地長于T組（P＜0.01）。
　　(2)血清AST活性與AL

4、T活性與C組相比，T組均呈上升趨勢(P＞0.05)，N組均接近C組;與T組相比，N組ALT活性呈下降趨勢，AST活性顯著下降(P＜0.05)，且AST/ALT呈顯著性降低(P＜0.05)。
　　(3)SOD活性三組間均不具有顯著差異(P＞0.05)。MDA含量T組較C組和N組非常顯著地升高(P＜0.01)，SOD/MDA較C組顯著下降(P＜0.05)，較N組非常顯著下降(P＜0.01);且與C組比較N組MDA含量顯著降低(P＜0.

5、05)，SOD/MDA較C組顯著增高(P＜0.05)。
　　(4)肝組織細胞HE染色顯示，C組的肝細胞結(jié)構(gòu)完整，無變性、壞死;T組的肝細胞有腫脹，間隙增大，細胞核變小，匯管區(qū)細胞浸潤現(xiàn)象。N組的肝細胞結(jié)構(gòu)完整、輪廓清晰分明，無變性、壞死;肝竇無淤血現(xiàn)象，細胞核呈圓形且規(guī)律整齊。
　　(5)TUNEL檢測顯示，C組的肝組織有少量細胞核被染成深棕褐色陽性物質(zhì)，凋亡指數(shù)為23.50±7.50％。T組有大量肝細胞核被染成深棕褐色陽性

6、物質(zhì)，凋亡指數(shù)為31.5±6.38％。N組較C組細胞核被染成深棕褐色陽性物質(zhì)略多，凋亡指數(shù)為28.33±9.48％。T組和N組有凋亡增高趨勢，T組趨勢較大，N組較弱。
　　(6)Western blot檢測顯示，與C組相比，N組和T組的Bcl-2和Bax蛋白表達量均呈上升趨勢(P＞0.05)，其中N組的Bcl-2表達量顯著和Bcl-2/Bax較C組和T組顯著升高(P＜0.05)而Bax蛋白表達量較C組和T組差異不具顯著性(P＞0.