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文檔簡介
1、MicroRNA是一類小非編碼 RNA,通過與靶 mRNA3′ UTR結(jié)合的方式抑制其翻譯或直接降解靶 mRNA。MicroRNA廣泛存在于動物當(dāng)中,他們參與許多重要的生理及病理過程。為了研究 miR-770在小鼠胚胎發(fā)育過程中的表達(dá)情況及其對早期胚胎發(fā)育可能存在的生物學(xué)意義,本文通過印記分析和原位雜交等方法,分別對miR-770的印記狀態(tài)以及其在胚胎發(fā)育、骨骼建成中的表達(dá)模式進(jìn)行了研究,實驗結(jié)果如下:
保守性分析結(jié)果表明,m
2、iR-770及其發(fā)卡型前體在人、大鼠、小鼠、獼猴、猩猩、黑猩猩和馬等高等哺乳動物中高度保守。全胚胎半定量 RT-PCR結(jié)果顯示,miR-770的表達(dá)起始于小鼠胚胎 E10.5d,并在胚期持續(xù)表達(dá),在E16.5d其相對表達(dá)量達(dá)到最高值;同時實驗發(fā)現(xiàn) MiR-770表現(xiàn)為組織差異性表達(dá),其在 E15.5d和E18.5d胚胎的腦、舌、肺等臟器中具有較高水平的表達(dá)。出生后,miR-770表現(xiàn)為腦組織特異性表達(dá)。印記分析結(jié)果表明在 DBA品系與C
3、57BL/6J品系小鼠之間,miR-770在 E15.5d及 E18.5d小鼠的腦、舌、肺中是印記的。原位雜交結(jié)果顯示成熟的miR-770在小鼠胚胎發(fā)育不同期呈動態(tài)的表達(dá)模式并具有很強的時空特異性。E10.5d和E11.5d胚胎中,成熟的miR-770在腦、肢芽、體節(jié)等處均表達(dá),隨著胚胎發(fā)育,成熟的miR-770的表達(dá)組織特異性增強,E15.5d和E16.5d,成熟的miR-770在骨骼系統(tǒng)中特異性表達(dá)。本研究表明小鼠中microRNA
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