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1、 本文為了證實(shí)或完善和補(bǔ)充蛋白質(zhì)分子交聯(lián)的三步假說(shuō),以原核生物的蛋白NADP特異性谷氨酸脫氫酶(NADP-GDH)和雞溶菌酶作為實(shí)驗(yàn)材料,采用PCR方法從大腸桿菌DH5a菌株中克隆得到NADP特異性谷氨酸脫氫酶基因,構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒并在大腸桿菌中高效表達(dá)重組NADP-GDH,應(yīng)用(His)6親和標(biāo)簽和固定化金屬親和層析技術(shù)純化出重組NADP-GDH,在體外進(jìn)行熱誘導(dǎo)去折疊和氧化重折疊實(shí)驗(yàn)。 結(jié)果發(fā)現(xiàn):純化的野生型重組NA
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