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1、該實驗室前期工作已經(jīng)克隆到瑞氏木霉外切葡聚糖纖維二糖水解酶I(CBHI)啟動子和終止子序列,分別把二序列插入到pUC19質(zhì)粒的多克隆位點,并在Pcbh1和Tcbh1之間插入了一段人工合成多克隆位點接頭.所構(gòu)建得到的高效表達(dá)載體質(zhì)粒命名為pTHIL,但對質(zhì)粒pTHIL未進(jìn)行實驗驗證.另外,前期工作已在pTHIL多克隆位點中插入了瑞氏木霉eg3基因,得到的重組質(zhì)粒命名為pTHIL-eg3,但Pcbh1-eg3-Tcbh1表達(dá)盒對瑞氏木霉的轉(zhuǎn)
2、化也沒有成功.該文通過對瑞氏木霉的基因定位置換,對其纖維素酶組分進(jìn)行了改造,得到了內(nèi)切葡聚糖酶活力升高,pNPC酶活力降低約60﹪的瑞氏木霉工程菌株P(guān)M13.具有新遺傳性狀的瑞氏木霉工程菌株有希望作為生產(chǎn)適于紡織、印染和制漿、造紙行業(yè)用新型酶制劑的工業(yè)菌株,對開發(fā)纖維素酶制劑新品種具有重要意義.帶有cbh1強(qiáng)啟動子和終止子的瑞氏木霉強(qiáng)表達(dá)整合型載體pTRIL的構(gòu)建成功以及蛋白酶缺陷菌株的獲得為在瑞氏木霉中進(jìn)行基因破壞,以及同源和異源基因
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