核基質(zhì)形態(tài)及蛋白表達在HMBA誘導(dǎo)人肝癌SMMC-7721細胞分化過程中的變化研究.pdf

1、細胞核基質(zhì)以及核基質(zhì)蛋白在細胞生命活動中起著重要的作用，本研究以腫瘤細胞核基質(zhì)為研究對象，通過高分辨率雙向凝膠電泳分離分析及MALDI-TOF-MS肽指紋(PMF)鑒定技術(shù)結(jié)合蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫查詢的方法，對環(huán)六亞甲基雙乙酰胺(hexamethylenebisacetamide，HMBA)誘導(dǎo)分化處理前后人肝癌SMMC-7721細胞核基質(zhì)抽提物進行差異蛋白質(zhì)組分析。鑒定與肝癌細胞相關(guān)的特異核基質(zhì)蛋白，并初步探索它們的表達變化在腫瘤細胞誘導(dǎo)分化

2、中的調(diào)節(jié)作用，為進一步深入研究腫瘤細胞惡性增殖與逆轉(zhuǎn)之間的機理提供理論依據(jù)。 經(jīng)5mMHMBA處理后，人肝癌SMMC-7721細胞出現(xiàn)了明顯的誘導(dǎo)分化效應(yīng)；細胞增殖受到抑制，細胞周期在G1/S期的阻滯顯著，且細胞超微結(jié)構(gòu)形態(tài)的惡性表型出現(xiàn)恢復(fù)性變化。選擇性抽提結(jié)合整裝電鏡樣品制備技術(shù)顯示細胞核基質(zhì)-中間纖維構(gòu)型由腫瘤細胞核基質(zhì)常見的粗細長短不規(guī)則積聚的纖維結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變?yōu)閷哟畏置?、精細發(fā)達的交織網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。經(jīng)HMBA處理后人肝癌細胞差

3、異表達的核基質(zhì)蛋白質(zhì)可分別在轉(zhuǎn)錄水平、轉(zhuǎn)錄后加工水平以及翻譯水平對基因表達起重要的調(diào)控作用，包括一些轉(zhuǎn)錄因子或輔因子：抑制Myc的轉(zhuǎn)錄活性的SIN3B蛋白，類TFIIH基礎(chǔ)轉(zhuǎn)錄因子復(fù)合物p44亞基，與腫瘤發(fā)生相關(guān)的myc、p53、pRB以及NF-KB、HDMs、ARF等多種轉(zhuǎn)錄因子相互作用的nucleophosmin；mRNA選擇性剪接因子SFRS1蛋白；以及在核糖體生物合成以及翻譯相關(guān)的p27BBP/eIF6、LBP。其中SFRS1是

4、新出現(xiàn)的蛋白質(zhì)。 這些研究結(jié)果表明，HMBA通過干預(yù)肝癌細胞在轉(zhuǎn)錄水平以及轉(zhuǎn)錄后加工水平上的調(diào)控，下調(diào)誘發(fā)腫瘤惡性增殖的轉(zhuǎn)錄因子和核糖體的生物合成，抑制腫瘤功能相關(guān)的特異性蛋白質(zhì)合成，來達到抑制腫瘤細胞生長的目的。并通過參與調(diào)節(jié)多種癌基因、抑癌基因的表達及其產(chǎn)物的活性，與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中多個環(huán)節(jié)的成員之間相互作用從而逆轉(zhuǎn)肝癌細胞的惡性增殖。證明了細胞增殖分化相關(guān)的特異核基質(zhì)蛋白在腫瘤誘導(dǎo)分化及增殖調(diào)控中起重要作用，為進一步探索這