氯沙坦對(duì)LPS誘導(dǎo)的星形膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)性增生的調(diào)節(jié)作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　血管緊張素 II受體阻滯劑(ARBs)，也稱為 AT1受體拮抗劑，是臨床上一類常用的抗高血壓藥物。近年來眾多研究證實(shí)了ARBs類藥物的腦保護(hù)作用，其相關(guān)機(jī)制可能與減輕腦內(nèi)的神經(jīng)元凋亡、氧化應(yīng)激反應(yīng)及炎癥反應(yīng)等有關(guān)。但關(guān)于ARBs類藥物對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)性增生的調(diào)節(jié)作用的研究還較少。本研究旨在探討ARBs類藥物氯沙坦預(yù)處理和后處理對(duì)LPS誘導(dǎo)的 GFAP表達(dá)( GFAP表達(dá)增加是星形膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)性增生的重要標(biāo)志)的影響，

2、及其作用機(jī)制是否與激活A(yù)MPK及其下游通路有關(guān)。
　　方法：
　　將成年雄性昆明小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、LPS損傷組、氯沙坦預(yù)處理組、Compound C+氯沙坦預(yù)處理組及氯沙坦后處理組。LPS損傷組：連續(xù)兩日側(cè)腦室注射LPS(24μg/6μL/d)；氯沙坦預(yù)處理組：于LPS給藥前14 d至LPS停藥后3 d分別每日腹腔注射氯沙坦0.5mg/kg、1mg/kg和5mg/kg；Compound C(10mg/kg/d, i.p.)

3、于LPS注射前兩天開始給藥，并連續(xù)給藥7d；氯沙坦后處理組：于每次 LPS給藥后立即給予氯沙坦(5 mg/kg，i.p.)，之后在該劑量下連續(xù)給藥3 d。對(duì)照組則相應(yīng)地給予生理鹽水。利用Western blot或免疫組化檢測(cè)LPS停藥后3 d時(shí)海馬組織GFAP、pAMPK/AMPK、P62、LC3II及 pmTOR/tmTOR蛋白的表達(dá)水平。利用新事物識(shí)別模型評(píng)價(jià)氯沙坦(5 mg/kg)預(yù)處理對(duì)LPS引起的學(xué)習(xí)記憶功能損傷的改善作用。<

4、br>　　結(jié)果：
　　LPS(24μg/6μL/d)連續(xù)給藥2d能誘導(dǎo)海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)性增生，與對(duì)照組相比，LPS處理組的 GFAP表達(dá)增加了76％±21%(p<0.05)，而氯沙坦預(yù)處理能濃依賴的抑制LPS誘導(dǎo)的GFAP表達(dá)，其中氯沙坦給藥劑量為5 mg/kg時(shí)抑制作用最強(qiáng)，而氯沙坦后處理并無明顯作用。LPS單獨(dú)給藥對(duì)海馬pAMPK的表達(dá)水平無明顯作用，但氯沙坦預(yù)處理能濃度依賴的誘導(dǎo)AMPK的磷酸化，其中5 mg/kg作用最

5、強(qiáng)。而氯沙坦后處理對(duì) pAMPK的表達(dá)水平并無調(diào)節(jié)作用。進(jìn)一步，給予 AMPK抑制劑Compound C能顯著抑制氯沙坦對(duì)LPS誘導(dǎo)的GFAP表達(dá)的下調(diào)作用。但是，LPS和氯沙坦對(duì)AMPK下游的mTOR激酶活性及自噬相關(guān)的標(biāo)志分子LC3II及p62的表達(dá)并無顯著影響。此外，與對(duì)照組相比，LPS損傷組的新事物識(shí)別分?jǐn)?shù)顯著下降(p<0.01)，而氯沙坦預(yù)處理能顯著逆轉(zhuǎn)LPS誘導(dǎo)的小鼠新事物識(shí)別能力的下降。
　　結(jié)論：
　　氯沙坦