2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁
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1、利用聚合酶鏈式反應將質粒pUC19/rhIFNα-2b上的化學合成人干擾素α-2b(rhIFNα-2b)基因cDNA擴增并重組至載體pBV220上,構建重組質粒pBV220/rhIFNα-2b,之后轉化大腸桿菌DH5α。經(jīng)篩選,檢測,測序正確后通過溫度誘導表達重組人干擾素α-2b,通過SDS-PAGE電泳觀察到了特異帶,經(jīng)AlphaImagerV5.1軟件分析化學合成人干擾素α-2b基因表達量最大時表達的人干擾素α-2b可占到菌體總蛋白

2、的36％。WesternBlotting檢測可見與IFNα抗體特異性結合的條帶,并且化學合成的人干擾素α-2b基因的表達量是天然人干擾素α-2b基因的表達量的約123.5倍。通過設計實驗對不同的表達溫度條件及使用不同的培養(yǎng)基對人干擾素α-2b蛋白表達的影響作了比較。研究不同的表達溫度對人干擾素α-2b蛋白表達的影響時發(fā)現(xiàn)利用LB培養(yǎng)基培養(yǎng),菌體在35℃培養(yǎng)到OD_(600)約0.4時轉移到30℃培養(yǎng)50min后立即升溫到42℃誘導表達,

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