藏藥浴的文化內涵及五味甘露藥浴顆粒對AA模型大鼠滑膜細胞的炎癥信號通路調控機制研究.pdf

1、類風濕性關節(jié)炎（RA）——屬于藏醫(yī)“真布病”范疇，在藏區(qū)是一種常見疑難性疾病，其發(fā)病率高，致殘率高，并可累及多器官、多系統(tǒng)引起系統(tǒng)性疾病。藏藥浴療法是藏醫(yī)對RA臨床效果確切的常用手段，而“五味甘露”藥浴是藏醫(yī)臨床上治療RA主要使用的成方制劑。藏藥浴已經成為國家非物質文化遺產保護項目，以及國家中醫(yī)藥管理局藏醫(yī)重點?？?。目前，對藏藥浴“五味甘露”的研究主要集中在臨床療效與浴后護理方面，藏藥浴對調整機體免疫系統(tǒng)的顯效性和高治愈率的研究也比較廣

2、泛。但從細胞層面對藏藥五味甘露藥浴顆粒作用于機體的機制缺乏系統(tǒng)科學的研究，對其抗RA的分子作用機制的研究尚不深入。
　　目的：
　　從藏醫(yī)學理論及藏藥浴文化內涵入手，以藏藥浴臨床經驗為指導，開展藏藥五味甘露藥浴顆粒藥效及其作用機制實驗研究。從整體動物模型層面，考察五味甘露藥顆粒在治療RA大鼠關節(jié)炎癥上的藥效作用；從細胞層面，分析其對RA大鼠滑膜組織中細胞因子的影響以及對蛋白表達的調控作用；從分析生物學層面，篩選與RA相關的分

3、子信息，探討五味甘露藥浴顆粒對RA滑膜細胞的JAK-STAT炎癥信號通路調控機制。
　　方法：
　　1.文化研究：從醫(yī)學人類學的視野，結合具體的藏醫(yī)學歷史和藏族沐浴文化背景，整合文獻學、田野調查等研究方法來闡釋藏藥浴的文化內涵。
　　2.實驗研究：將大鼠造模經藏藥浴治療后：①采用致炎后足容積測量、免疫器官的臟器系數(shù)、及踝關節(jié)病理形態(tài)的比較，評價五味甘露藥浴顆粒對AA大鼠的治療效果；②采用酶聯(lián)反應、免疫組化法檢測并分析五

4、味甘露藥浴顆粒對滑膜組織中細胞因子及蛋白表達的干預效應；③采用基因芯片技術，檢測滑膜細胞中的JAK-STAT信號通路中相關信號分子的表達，并用RT-PCR法進行驗證，探討五味甘露藥浴顆粒對RA滑膜細胞的JAK-STAT信號通路的調控機制。
　　結果：
　　1.擁有一千多年歷史的藏藥浴蘊含著豐富的藏族沐浴文化，并以藏醫(yī)藥理論為指導在臨床廣泛開展。它集醫(yī)療、養(yǎng)生、保健等多種功能于一體，是具有歷史、文化、經濟等多重價值的藏醫(yī)外治療

5、法。
　　2.五味甘露藥浴顆粒高劑量組（11.80g·L-1）、中劑量組（5.90g·L-1）、低劑量組（2.95g·L-1）AA大鼠原發(fā)性足腫脹度均有減輕，滑膜細胞增生、炎細胞浸潤、關節(jié)軟骨破壞均有不同程度的改善；血清中白細胞介素-1β(IL-1β)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、生長因子（EGF、bFGF、PDGF-BB）、前列腺素E2（PGE2）、基質金屬蛋白酶（MMP-3、TIMP-1）的含量均有不同程度的下降。該藥可以

6、抑制滑膜細胞JAK-STAT信號通路的激活，使P-STAT1、P-STAT3、IL-6表達下降，IL-10表達上升；在JAK-STAT信號通路上Il2rb、Mpl、Stam等相關信號分子表達上調，PIAS1、PIAS3、SOCS4、EPO、IFNGR2等相關信號分子表達下調。
　　結論：
　　1.藏藥浴既是生物學意義上的科學，也是人類學意義上的文化，具有自然科學和人文科學的雙重特征。要充分理解藏醫(yī)藥文化內涵，把人文文化和科學

7、文化相融，借鑒西醫(yī)的科學技術手段開展對藏藥浴的現(xiàn)代研究。
　　2.藏藥?。ㄎ逦陡事端幵☆w粒）在類風濕關節(jié)炎滑膜病理改變的過程中，通過下調致炎因子(TNF-α、IL-1,6等)、上調抗炎因子(IL-10)來激活體內免疫系統(tǒng)，抑制成纖維樣滑膜細胞分泌各類細胞因子對滑膜的刺激，來控制關節(jié)滑膜炎癥。對滑膜細胞JAK-STAT炎癥信號通路中相關信號分子的表達有良性調節(jié)作用，進而調控細胞核內基因轉錄，而最終達到抑制RA滑膜細胞增殖、促進細胞凋