硫化氫減輕阿爾茨海默病小鼠學(xué)習(xí)記憶減退作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：通過APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因阿爾茨海默病（AD）小鼠，觀察外源性硫化氫（H2S）對AD小鼠學(xué)習(xí)記憶功能減退的影響，并探索其可能的作用機(jī)制。
　　方法：將9月齡雄性APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因AD小鼠30只隨機(jī)均分為兩組：APP/PS1組（APP/PS1+NS），APP/PS1給藥組（APP/PS1+NaHS）；同性別同月齡野生型（WT）小鼠20只隨機(jī)均分為兩組：正常組（WT+NS），正常給藥組（WT+NaHS）。APP/PS1給藥組

2、、正常給藥組每日一次腹腔注射硫氫化鈉（NaHS，一種H2S供體）2.8 mg/kg，正常組、APP/PS1組腹腔注射等體積生理鹽水（NS），連續(xù)3個(gè)月。Morris水迷宮檢測小鼠學(xué)習(xí)記憶能力。行為學(xué)檢測結(jié)束后，麻醉小鼠，取材，硫磺素-S染色法檢測小鼠海馬和皮質(zhì)區(qū)老年斑；尼氏染色法檢測小鼠海馬神經(jīng)元存活情況；Western blot法檢測小鼠海馬和大腦皮質(zhì)H2S合成酶：胱硫醚β合成酶（CBS）和3-巰基丙酮酸硫基轉(zhuǎn)移酶（3MST）蛋白表達(dá)

3、；β-淀粉樣蛋白(Aβ)生成途徑的主要蛋白：β淀粉樣前體蛋白（APP）、β位點(diǎn)APP剪切酶1（BACE1）的表達(dá)及Aβ1-40、Aβ1-42含量；細(xì)胞內(nèi)主要抗氧化應(yīng)激蛋白：核因子E2相關(guān)因子2（Nrf2）、血紅素加氧酶-1（HO-1）、谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶（GST）的表達(dá)。
　　結(jié)果：1. APP/PS1組較正常組小鼠逃避潛伏期（escape latency）明顯延長，穿越目標(biāo)象限次數(shù)（目標(biāo)停留時(shí)間百分比）顯著減少；海馬和大腦皮質(zhì)區(qū)老

4、年斑大量形成且融合成團(tuán)；海馬CA3和DG區(qū)細(xì)胞出現(xiàn)深染固縮現(xiàn)象且尼氏體數(shù)量減少；海馬和大腦皮質(zhì)組織中H2S合成酶：3MST、CBS蛋白表達(dá)水平顯著降低；Aβ生成途徑的主要蛋白：APP、BACE1表達(dá)及Aβ1-40、Aβ1-42含量明顯增加；細(xì)胞內(nèi)主要抗氧化應(yīng)激蛋白Nrf2、HO-1、GST表達(dá)明顯減少。2.正常給藥組較正常組小鼠上述指標(biāo)沒有明顯差異。3.APP/PS1給藥組較APP/PS1組逃避潛伏期明顯縮短，穿越目標(biāo)象限次數(shù)明顯增多；

5、海馬和大腦皮質(zhì)區(qū)老年斑數(shù)量明顯減少且多為小體積；海馬CA3和DG區(qū)細(xì)胞深染固縮現(xiàn)象減少且尼氏體數(shù)目增多；海馬和大腦皮質(zhì)中3MST、CBS蛋白表達(dá)水平顯著升高；Aβ生成途徑的主要蛋白：APP、BACE1表達(dá)及Aβ1-40、Aβ1-42含量明顯降低；細(xì)胞內(nèi)主要抗氧化應(yīng)激蛋白Nrf2、HO-1、GST表達(dá)明顯增加。
　　結(jié)論：在本實(shí)驗(yàn)條件下，H2S減輕阿爾茨海默病小鼠學(xué)習(xí)記憶減退作用和減少老年斑的數(shù)量及阻遏存活神經(jīng)元數(shù)量減少，其機(jī)制可能